DPBS vs PBS
PBS eller phosphatbufret saltvand og Dulbeccos phosphatbufrede saltvand (DPBS) er bufrede saltvand anvendt i biologiske undersøgelser. PBS og DPBS bruges i forskning, der involverer celler. Opløsningens ionkoncentration og osmolaritet er isoton, dvs. den er kompatibel med den menneskelige krop. Pufferen letter det at tilvejebringe og bevare en stabil pH på 7,2-7,6.
Der er ingen signifikant forskel mellem PBS og DPBS. Begge af dem indeholder natriumphosphat, natriumchlorid og, om nødvendigt, kaliumphosphat og kaliumchlorid. Andre præparater, såsom DPBS, kan muligvis ikke indeholde calcium og magnesium. PBS og DPBS har adskillige applikationer, fordi de ikke er skadelige for celler. Både PBS og DPBS kan bruges til at skylle instrumenter eller containere, der er forurenet med celler. Begge kan også bruges i fortyndingsstoffer. Vandmolekyler i fortyndingsmidler som protein standses og tørres op. Vandet, der kombineres med stoffet, forhindrer, at stoffet gennemgår konformationelle ændringer, såsom denaturering. Calcium- og magnesiumopløsninger kan begrænse aktiviteten af trypsin. I ellipsometri kan adsorptionen af protein måles ved at tage et basisspektrum under anvendelse af PBS.
Phosphatbufret saltvand med additiver, såsom EDTA, kan bruges til at adskille bundlede celler. Udfældning dannes, når zink, et divalent metal, sættes til PBS, hvorfor det ikke kan sættes til ikke-sammenkoblede celler. Good's buffer bruges i stedet for zink i denne type situation.
Phosphatbufret saltvand og Dulbeccos phosphatbufrede saltvand fremstilles på adskillige måder. En måde at forberede det på er ved at opløse 800 g. natriumchlorid, 20 g. kaliumchlorid, 2 molekyler vand, 24 g. kaliumphosphat og 144 g. natriumphosphat i 8 liter destilleret vand. Resultatet bliver 10 liter 10x PBS. Mål direkte pH af PBS ved hjælp af et pH-meter, når man fremstiller bufrede opløsninger. Opløsningens pH kan justeres ved anvendelse af natriumhydroxid eller saltsyre. Phosphatpufret saltvand som fortyndingsmiddel fremstilles med en slutkoncentration på 10 mM phosphat, 137 mM natriumchlorid, 2,7 mM kaliumchlorid og en pH på 7,4. Fritsch, Sambrook og Maniatis har deres egen måde at forberede pufferløsninger på i deres bog med titlen "Molecular Cloning." Følgelig, for en liter 1x PBS, begynder præparatet med 800 ml. vand, der destilleres. Inkluder 8 g. natriumchlorid såvel som 0,2 g. af kaliumchlorid. 1,44 g natriumphosphat tilsættes derefter efterfulgt af 0,24 g. af kaliumphosphat. Tilsættes saltsyre for at justere pH til 7,4. For at komme med 1 liter PBS, tilsættes mere destilleret vand, indtil det nivelleres op til 1 liter. Dul den resulterende opløsning ud i en portion, og brug autoklaven til at sterilisere opløsningen. Juster autoklaven til 121 ° C og autoklaver den i 20 minutter i væskecyklussen. Opbevar derefter opløsningen ved stuetemperatur.
Selvom phosphatbufret saltvand og Dulbeccos phosphatbufrede saltvand fremstilles på mange måder, er indholdet stadig det samme. Uanset hvordan det forberedes, er resultaterne og anvendelserne derfor stadig de samme.
Resumé:
1.PBS eller phosphatbufret saltvand og Dulbeccos phosphatbufrede saltvand (DPBS) er bufrede saltvand anvendt i biologiske studier.
2. Opløsningens ionkoncentration og osmolaritet er isotonisk, dvs. den er kompatibel med den menneskelige krop. Pufferen letter det at tilvejebringe og bevare en stabil pH på 7,2-7,6.
3.Der er ingen signifikant forskel mellem PBS og DPBS. Begge af dem indeholder natriumphosphat, natriumchlorid og, om nødvendigt, kaliumphosphat og kaliumchlorid. Andre præparater, såsom DPBS, kan muligvis ikke indeholde calcium og magnesium.
4.Både PBS og DPBS kan bruges til at skylle instrumenter eller containere, der er forurenet med celler. Begge kan også bruges i fortyndingsstoffer. Vandmolekyler i fortyndingsmidler som protein standses og tørres op. Vandet, der kombineres med stoffet, forhindrer, at stoffet gennemgår konformationelle ændringer, såsom denaturering. Calcium- og magnesiumopløsninger kan begrænse aktiviteten af trypsin. I ellipsometri kan adsorptionen af protein måles ved at tage et basisspektrum under anvendelse af PBS.
5. Phosphatbufret saltvand med additiver, såsom EDTA, kan bruges til at adskille bundlede celler. Udfældning dannes, når zink, et divalent metal, sættes til PBS, hvorfor det ikke kan sættes til ikke-sammenkoblede celler. Good's buffer bruges i stedet for zink i denne type situation.
6.PBS og DPBS fremstilles på adskillige måder. Selvom phosphatbufret saltvand og Dulbeccos phosphatbufrede saltvand fremstilles på mange måder, er indholdet stadig det samme. Uanset hvordan det forberedes, er resultaterne og anvendelserne derfor stadig de samme.