Forskel mellem Bradford og Lowry Protein Assay

Det vigtigste forskel mellem bradford og lowry protein assay er det Bradford proteinassay er baseret på absorbansskiftet af farvestoffet Coomassie strålende blå G-250, mens Lowry proteinassay er baseret på reaktionen af ​​kobberioner (Cu +) -ioner produceret ved oxidation af peptidbindinger med Folin-Ciocalteu reagens.

Et assay er en analytisk teknik, der hjælper med at karakterisere de vigtigste funktionelle komponenter i en prøve. Derfor kan et assay enten være en kvalitativ eller kvantitativ test. Mange områder, herunder laboratoriemedicin, farmakologi, miljøbiologi, molekylærbiologi, biokemi og immunologi bruger denne type assays rutinemæssigt. Bradford og Lowry proteinassay er to biokemiske assays, der bestemmer proteinkoncentrationen i en prøveopløsning. Begge assays anvender kolorimetriske teknikker til at give resultater.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er Bradford Protein Assay
3. Hvad er Lowry Protein Assay
4. Ligheder mellem Bradford og Lowry Protein Assay
5. Sammenligning side ved side - Bradford vs Lowry Protein Assay i tabelform
6. Resume

Hvad er Bradford Protein Assay?

Bradford proteinassay er en hurtig spektroskopisk analytisk procedure til proteinanalyse. Det viser stor nøjagtighed, når man måler proteinkoncentrationen i en opløsning. Marion Bradford introducerede denne procedure i 1976. I denne analyse er den samlede reaktion baseret på aminosyresammensætningen af ​​de målte proteiner. Med andre udtryk er Bradford proteinassay et kolorimetrisk assay. Det bruger farvestoffet Coomassie strålende blåt. Dette kolorimetriske proteinassay afhænger derfor af farvestoffets absorbansskifte. Coomassie strålende blå G-250 findes i tre formater: kationisk (rød), anionisk (blå) og neutral (grøn). Under sure forhold konverteres den røde form af farvestoffet til blåt. Det bekræfter proteinets binding. Hvis proteinet ikke er til stede, kan opløsningen forblive i brun farve.

Figur 01: Bradford proteinassay

Bradford proteinassay adskiller sig fra andre proteinassays, da det er mindre modtageligt for interferenser af forskellige kemiske forbindelser, der er til stede i proteinopløsningen. Disse forbindelser inkluderer natrium, kalium, glukose og saccharose osv.

Hvad er Lowry Protein Assay?

Lowry protein assay er et biokemisk assay, der bruges til at bestemme det samlede niveau af protein i en opløsning. Oliver H. Lowry er den person, der udviklede dette reagens i 1940. Proceduren viser den totale proteinkoncentration af opløsningen ved en farveændring, der er proportional med proteinkoncentrationen i opløsningen. Derfor er dette også et kolorimetrisk proteinassay.

Reaktionen mellem kobberioner (Cu +) produceret ved oxidation af peptidbindinger og Folin-Ciocalteu-reagens er grundlaget for denne procedure. Dette reagens indeholder også phosphomolybdinsyre og phosphor-wolframinsyre. Imidlertid er reaktionsmekanismen ved Lowry-proteinassay ikke godt forstået. Men det involverer oxidation af cystein, tryptophan og tyrosinrester ved reduktion af Folin-Ciocalteu-reagens.

Figur 02: Lowry protein assay

Cysteinrester bidrager til absorbansen observeret i Lowry-proteinanalyse, og reaktionen resulterer i et strålende blåt molekyle; heteropoly molybdænblå. Reduktionen af ​​dette molekyle måles ved absorbans ved 660 nm. Koncentrationen af ​​cystein- og tryptophanrester, der reducerede Folin-Ciocalteu-reagens, udleder derfor den samlede koncentration af proteinet i opløsningen.

Hvad er ligheden mellem Bradford og Lowry Protein Assay?

• Bradford- og Lowry-proteinanalyser bestemmer proteinkoncentrationen i en opløsning.
• Begge metoder er farveimetriske metoder.
• Følsomheden ved begge metoder er også høj.

Hvad er forskellen mellem Bradford og Lowry Protein Assay?

Bradford og Lowry proteinassay er to typer assays, der bestemmer proteinkoncentration i en opløsning. Bradford proteinassay afhænger af absorbansskiftet af farvestoffet Coomassie strålende blå G-250, mens Lowry-proteinassay afhænger af reaktionen af ​​kobberioner produceret ved oxidation af peptidbindinger med Folin-Ciocalteu reagens. Så dette er den vigtigste forskel mellem Bradford og Lowry proteinassay. Bradford-proteinassay tager 15 minutter at producere et resultat, mens det kræver 40-60 minutter for Lowery-proteinassay at producere et resultat. Dette er således en anden forskel mellem Bradford og Lowry proteinassay. Endvidere er Bradford-proteinassay afhængig af aminosyresammensætningen, mens Lowry-proteinassay delvis er afhængig af aminosyresammensætningen. Derfor er dette også en forskel mellem Bradford og Lowry proteinassay.

Nedenfor inforafisk giver flere detaljer om forskellen mellem Bradford og Lowry proteinassay.

Resume - Bradford vs Lowry Protein Assay

Et assay er en analytisk teknik, der anvendes til at karakterisere den vigtigste funktionelle komponent i en prøve. Bradford og Lowry proteinassay er to typer proteinassays, der fungerer under kolorimetriske teknikker. Både Bradford- og Lowry-proteinanalyser bestemmer proteinkoncentrationen i en opløsning. Den største forskel mellem Bradford og Lowry Protein Assay ligger dog på den kolorimetriske teknik, de bruger. Bradford proteinassay bruger Coomassie strålende blå G-250, mens Lowry proteinassay bruger kobberioner (Cu +) -ioner og Folin-Ciocalteu-reagens. Derudover giver Bradford-metoden hurtige resultater end Lowry-proteinassay. Begge metoder er imidlertid meget følsomme metoder og udsættes for interferens fra forskellige stoffer.

Reference:

1. "Canadian Journal of Botany." Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, tilgængelig her.
2. "Kemi af proteinanalyser." Thermo Fisher Scientific - USA, tilgængelig her.

Billede høflighed:

1. “Bradford protein assay” Af Helito - Eget arbejde (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia