Dyrecelledyrkning udføres for at opretholde dyrecellelinjer for at udføre mange forskningsaktiviteter. Dyrecellelinier opretholdes under sterile betingelser, og de kræver specielle teknikker. De bruges i undersøgelser vedrørende vaccineproduktion, til at identificere cellens adfærd over for kræftfremkaldende stoffer og mutagener og i kræftforskning. Cellekulturmedierne er meget vigtige for succes med dyrecellekultur. Der er forskellige typer cellekulturmedier såsom Dulbeccos modificerede Eagle Medium (DMEM) og Eagles minimum essentielle medium (EMEM). DMEM er et modificeret basalmedium med øget aminosyre- og vitaminkoncentration op til en firedobling. Dette inkluderer også nogle flere substitutioner, der øger mediets næringsstofbetingelser. EMEM er en af de første typer dyrecellekulturmedier udviklet af Harry Eagle. Det er et simpelt, basalt medie med minimale mængder næringssammensætninger. Det vigtigste forskel mellem to medier er næringssammensætningen. EMEM er sammensat af de minimale koncentrationer af næringsstoffer, der kræves til vækst af kulturen, mens DMEM er et meget komplekst medie med øgede koncentrationer af aminosyrer og vitaminer.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er DMEM
3. Hvad er EMEM
4. Ligheder mellem DMEM og EMEM
5. Sammenligning side ved side - DMEM vs EMEM i tabelform
6. Resume
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) er en modificeret medietype, der er kommercielt fremstillet som et cremet hvidt pulver. Dette tilpasses fra EMEM, og næringssammensætningen ændres ved at øge koncentrationen af aminosyrer og vitaminer. Koncentrationen af aminosyrer øges op til to gange sammenlignet med det basale medium. Vitaminkoncentrationen øges op til firedoblet, hvilket øger næringsindholdet i mediet.
DMEM modificeres også ved at tilsætte flere salte, såsom ferri nitrat, natriumpyruvat og nogle ikke-essentielle aminosyrer, såsom serin og glycin. Koncentrationen af glukose i medierne ændres også. Den oprindelige formulering er sammensat af 1000 mg / L glucose, mens koncentrationen i DMEM øges op til 4500 mg / L. DMEM kræver også tilskud af et serummedium, da det ikke er et komplet medium. Oftest suppleres DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS tilvejebringer de krævede proteiner og vækstfaktorer til dyrkningsprocessen.
PH i mediet varierer ved tilsætning af natriumbicarbonat. pH i mediet før tilsætning af natriumbicarbonat er omkring 6,80 - 7,40, hvorimod pH efter tilsætning af natriumbicarbonat ligger i området 7,60 - 8,20. Lagringstemperaturen på mediet er 2 - 8 0C.
Figur 01: DMEM
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) er et af de første udviklede medier inden for cellekultur af dyrecellelinjer. De første typer af dyrecellelinier dyrket ved hjælp af EMEM inkluderer Mouse L-celler og HeLa-celler. EMEM-medierne er også en type ændrede medier. Harry Eagle formulerede først EMEM-mediet. EMEM-medier inkluderede de essentielle aminosyrer og vitaminer i en minimumskoncentration, der kræves af celletyperne. De ikke-essentielle aminosyrer var ikke inkluderet i formuleringen, og glukose- og natriumbicarbonatkoncentrationerne reduceres. Selvom medierne indeholdt den afbalancerede mængde af minimumsvækstkrav til den succesrige vækst af cellerne.
EMEM er ikke et komplet medium. Derfor er supplement med serum påkrævet for den vellykkede vækst af pattedyrcellerne. EMEM bruges på en lang række celler og er stadig et populært medie blandt cellekulturforskere.
DMEM vs EMEM | |
DMEM er en modificeret type basalmedium med øgede aminosyre- og vitaminkoncentrationer. Dette inkluderer også nogle flere substitutioner, der øger mediets næringsstofbetingelser. | EMEM er en af de første typer dyrecellekulturmedier udviklet af Harry Eagle. Det er et simpelt, basalt medie med minimale mængder næringssammensætninger. |
Ændringer af aminosyre | |
Aminosyre-koncentration er steget op til to gange i DMEM-medium. | Minimal koncentration af aminosyre bruges i EMEM. |
Ændringer af vitaminer | |
Vitaminkoncentrationen er steget op til firedoblet i DMEM. | Minimal koncentration af vitaminer bruges i EMEM. |
Glukosekoncentration | |
Glukosekoncentration er steget op til 4500 mg / L i DMEM. | Glukosekoncentration er 1000 mg / l i EMEM. |
Tilstedeværelse af ikke-essentielle aminosyrer | |
Til stede i DMEM. | Fraværende i EMEM. |
Tilstedeværelse af yderligere komponenter | |
Komponenter som jernnitrat, natriumpyruvat er til stede i DMEM. | EMEM indeholder den minimale mængde næringsstoffer. |
DMEM og EMEM er to populære dyrecellekulturmedier, der hovedsageligt adskiller sig i deres næringssammensætning. DMEM er modificeret form af EMEM, hvor næringsstofkoncentrationerne øges sammen med tilføjelsen af nogle nye komponenter. EMEM er et minimalt medie og indeholder alle de væsentlige faktorer, der kræves for en vellykket vækst af dyrecellelinierne. Disse medier skal bruges under høje sterile forhold, og begge medier bør suppleres med serum før brug. Dette er forskellen mellem DMEM og EMEM.
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offline-formål som pr. Citatnotat. Download PDF-version her Forskel mellem DMEM og EMEM
1.Arora, Meenakshi. “Cell Culture Media: A Review.” Materialer og metoder, 25. november 2017. Findes her
2. "Eagles minimale essentielle medium." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 24. december 2017. Tilgængelig her
1.'Lifetech-DMEM'By Phaeton68 - Eget arbejde, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia