Forskel mellem flowcytometri og FACS

Nøgleforskel - Flowcytometri vs FACS

I forbindelse med celleteori er celler den grundlæggende strukturelle og funktionelle enhed for alle levende organismer. Cellesortering er en metode, der bruges til at adskille forskellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske træk. De kan have intracellulære eller ekstracellulære egenskaber. Interaktion mellem DNA, RNA og proteiner betragtes som intracellulære interaktive egenskaber, medens form, størrelse og forskellige overfladeproteiner betragtes som ekstracellulære egenskaber. I moderne videnskab har cellesorteringsmetodologier ført til at hjælpe de forskellige undersøgelser i biologiske studier og også til etablering af nye principper gennem forskning i medicin. Cellesortering udføres på forskellige metodologier, som inkluderer både primitivt med mindre udstyr og avancerede teknologiske metoder med anvendelse af sofistikeret maskiner. Flowcytometri, fluorescerende aktiveret cellesortering (FACS), magnetisk celleudvælgelse og enkeltcellesortering er de vigtigste metoder, der anvendes. Flowcytometri og FACS er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber. FACS er en specialiseret type flowcytometri. Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, der muliggør undersøgelse af enkeltceller. FACS er en proces, ved hvilken en prøveblanding af celler sorteres efter deres lysspredning og fluorescenskarakteristika i to eller flere containere. Dette er vigtigste forskel mellem flowcytometri og FACS.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er flowcytometri
3. Hvad er FACS
4. Ligheder mellem flowcytometri og FACS
5. Sammenligning side ved side - Flowcytometri vs FACS i tabelform
6. Resume

Hvad er flowcytometri?

Flowcytometri er en metode, der anvendes til at undersøge og bestemme ekspressionen af intracellulære molekyler og celleoverfladen og til at definere og karakterisere forskellige celletyper. Det bruges også til bestemmelse af cellevolumen og cellestørrelse og til at evaluere renheden af subpopulationer, der er isoleret. Dette muliggør evaluering af flere parametre af enkelte celler på omtrent samme tid. Flowcytometri bruges til at måle intensiteten af fluorescens, der produceres på grund af fluorescerende mærkede antistoffer, som hjælper med at identificere proteiner eller ligander, der binder til tilknyttede celler.

Figur 01: Flowcytometri

Generelt inkluderer flowcytometri hovedsageligt tre undersystemer. De er fluidik, elektronikken og optikken. I flowcytometri er der fem hovedkomponenter tilgængelige, der bruges til cellesortering. De er en strømningscelle (en strøm af væske, der bruges til at transportere dem og justere cellerne til optisk sanseproces), et målesystem (kan være af forskellige systemer, herunder kviksølv- og xenonlamper, vandkølet med høj effekt eller luftkølede lasere eller diodelasere med lav effekt), en ADC; Analog til digital konverteringssystem, forstærkningssystem og en computer til analyse. Erhvervelsen er den proces, hvormed dataene indsamles fra prøverne ved hjælp af flowcytometer. Denne proces formidles af en computer, der er forbundet med flowcytometeret. Softwaren, der findes på computeren, analyserer informationen, der føres til computeren fra flowcytometeret. Softwaren har også evnen til at justere parametre for eksperimentet, der styrer flowcytometeret.

Hvad er FACS?

I forbindelse med flowcytometri, Fluorescensaktiveret cellesortering (FACS) er en metode, der anvendes til at differentiere og sortere en prøve af en blanding af biologiske celler. Cellerne adskilles fra to eller flere containere. Sorteringsmetoden er baseret på de fysiske træk ved cellen, der inkluderer lysspredning og fluorescenskarakteristika for cellen. Dette er en vigtig videnskabelig teknik, der kan bruges til at opnå pålidelige kvantitative og kvalitative resultater af fluorescenssignaler, der udsendes fra hver celle. Under FACS oprindelig den præ-opnåede blanding af celler; en suspension ledes til midten af en smal væskestrøm, der strømmer hurtigt. Væskestrømmen er designet til at adskille cellerne i suspensionen baseret på diameteren af hver celle. En vibrationsmekanisme påføres suspensionstrømmen, som resulterer i dannelse af individuelle dråber.

Figur 02: FACS

Systemet er kalibreret for at skabe en enkelt dråbe med en celle. Lige inden dannelsen af dråber bevæger strømningssuspensionen sig langs et fluorescensmåleapparat, der detekterer fluorescenskarakteristikken for hver celle. På dannelsespunktet for dråber anbringes en elektrisk opladningsring, som en ladning induceres til ringen inden måling af fluorescensintensiteten. Når dråberne først er dannet fra suspensionstrømmen, fanges en ladning inde i dråberne, som derefter går ind i et elektrostatisk afbøjningssystem. Ifølge ladningen dirigerer systemet dråberne i forskellige containere. Metoden til anvendelse af ladningen varierer afhængigt af forskellige systemer, der anvendes i FACS. Det udstyr, der bruges i FACS, er kendt som en fluorescensaktiveret cellesorterer.

Hvad er ligheden mellem flowcytometri og FACS?

Flowcytometri og FACS er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber.

Hvad er forskellen mellem flowcytometri og FACS?

Flowcytometri vs FACS
Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, der muliggør undersøgelse af enkeltceller.	FACS er en proces, ved hvilken en prøveblanding af celler sorteres efter deres lysspredning og fluorescenskarakteristika i to eller flere containere.

Resume - Flow Cytometri vs FACS

Cellen er den grundlæggende strukturelle og funktionelle enhed for alle levende organismer. Cellesortering er den proces, hvormed celler isoleres og differentieres i forskellige kategorier baseret på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaber. Flowcytometri og FACS er to vigtige metoder i cellesortering. Begge processer er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber. Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, der muliggør undersøgelse af enkeltceller. FACS er en proces, ved hvilken en prøveblanding af celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescenskarakteristika i to eller flere beholdere. Dette er forskellen mellem Flowcytometri og FACS.

Download PDF-versionen af Flowcytometri vs FACS

Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offline-formål som pr. Citatnotat. Download PDF-version her Forskel mellem flowcytometri og FACS

Reference:

Flowcytometri (FCM) / FACS | Fluorescensaktiveret cellesortering (FACS). Åbnede 22. september 2017. Findes her
Ibrahim, Sherrif F. og Ger van den Engh. “Flowcytometri og cellesortering.” SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. januar 1970… Åbnede 22. september 2017. Findes her

Billede høflighed:

'Cytometer'By Kierano - Eget arbejde, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia
'Fluorescensassisteret cellesortering (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Udvikling af et in vitro model-system til undersøgelse af interaktionen af Equus caballus IgE med den højaffinitets-FcεRI-receptor (ph.d.-afhandling), University of Sheffield , (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia

Videnskab & natur