Forskel mellem genforstærkning og genkloning

Det vigtigste forskel mellem genamplifikation og genkloning er, at genamplifikation er processen til at fremstille mange kopier af genet af interesse in vitro ved en polymerasekædereaktion. Men genkloning er en proces til at fremstille mange kopier af genet af interesse in vivo ved at fremstille et rekombinant plasmid og omdanne det til en værtsbakterie.

Et gen er et specifikt fragment af DNA, der koder for et protein. En organisme besidder tusinder af gener. Derudover er det muligt at multiplicere DNA-sekvenserne for vigtige gener under anvendelse af molekylærbiologiske teknikker. Genamplifikation og genkloning er to sådanne procedurer. Begge procedurer producerer mange kopier af et gen af ​​interesse. Der er imidlertid en forskel mellem genamplifikation og genkloning med hensyn til deres metode.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er genforstærkning
3. Hvad er genkloning
4. Ligheder mellem genforstærkning og genkloning
5. Sammenligning side ved side - Genforstærkning vs genkloning i tabelform
6. Resume

Hvad er genforstærkning?

Genamplifikation er processen til at fremstille kopier af et bestemt gen ved anvendelse af polymerasekædereaktion. For at amplificere et gen skal DNA'et fra den bestemte organisme ekstraheres ved hjælp af en korrekt DNA-ekstraktionsprotokol. Derefter bør det ekstraherede dobbeltstrengede DNA denatureres for at opnå adskilte enkeltstrenge. Det næste trin inkluderer anvendelse af en PCR-reaktion til at fremstille kopier af genet af interesse. Yderligere indeholder PCR-blandingen nødvendige primere, nukleotider, DNA-polymeraseenzym, template-DNA og andre ingredienser. Ved afslutningen af ​​PRC-programmet finder amplificering af genet af interesse sted.

Figur 01: Genforstærkning

Endvidere er genamplifikation et første trin i påvisningen af ​​en specifik sekvens, identifikation af en organisme, diagnosticering af sygdomme og fremstilling af genbiblioteker osv..

Hvad er genkloning?

Genkloning er en metode inden for genteknologi til at fremstille genbiblioteker eller fremstille mange kopier af genet af interesse. Denne proces involverer fremstilling af et rekombinant plasmid og omdannelse af det rekombinante plasmid til en værtscelle, især en bakteriecelle. Klon er en identisk kopi af den originale organisme eller et molekyle. Genkloning kan gøre tusinder af genkloner.

Figur 02: Genkloning

Når genet af interesse er identificeret, kan det adskilles fra genomet til en bestemt organisme ved at begrænse det med specifikke restriktionsenzymer. Derefter skal der ved hjælp af det samme restriktionsenzym åbnes plasmider (vektorer) for at indsætte genfragmentet. Derefter transformeres det rekombinante plasmid til en værtsbakterie ved anvendelse af forskellige fremgangsmåder, såsom elektroporering. Nogle af de rekombinante plasmider indgår i værtsbakterieceller. Ved anvendelse af et antibiotikum kan de transformerede bakterier vælges, isoleres og dyrkes i friske medier. Således hjælper denne teknik med at opnå millioner af genkloner.

Hvad er lighederne mellem genforstærkning og genkloning?

• Genamplifikation og genkloning er to molekylære biologiske teknikker.
• I begge disse teknikker multipliceres en bestemt DNA-sekvens eller et gen i million eller tusinder gange.
• Derudover er begge teknikker yderst vigtige for mange videnskabelige områder.

Hvad er forskellen mellem genforstærkning og genkloning?

Genamplifikation er en proces, der bruger kopier af et bestemt gen in vitro metode kaldet PCR. På den anden side er genkloning en proces, der bruger kopier af et bestemt gen in vivo metode via konstruktion af rekombinante vektorer og multiplicering af dem i levende organisme. Så dette er den vigtigste forskel mellem genamplifikation og genkloning. Endvidere tager genamplifikation kun et par timer, mens genkloning tager flere dage at gennemføre. Derfor kan vi også betragte dette som en forskel mellem genamplifikation og genkloning. Derudover viser genamplifikationsprocessen færre fejl, mens genkloningsprocessen viser flere fejl.

Følgende infographic opsummerer forskellen mellem genamplifikation og genkloning.

Resume - Genforstærkning vs genkloning

Genamplifikation er processen til at fremstille kopier af det ønskede gen under anvendelse af polymerasekædereaktion under in vitro-betingelser, mens genkloning er processen til at fremstille kopier af et gen af ​​interesse under anvendelse af et rekombinant DNA-molekyle og en levende organisme / værtsbakterie. Dette er således den grundlæggende forskel mellem genamplifikation og genkloning.

Reference:

1. "Molekylær kloning." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2. august 2019, tilgængelig her.
2. "Genforstærkning." Genforstærkning - en oversigt | ScienceDirect-emner, tilgængelig her.

Billede høflighed:

1. “PCR” af Madprime - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Steps of Molecular Cloning” af Alexpicardal97 - Eget arbejde (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia