Forskellen mellem Gram Stain og Culture

Nøgleforskel - Gram Stain vs Culture

Gramfarvning er en farvningsteknik, der udføres for at differentiere bakterier i to grupper i henhold til tykkelsen af peptidoglycanlaget i deres cellevæg. Kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer under laboratoriebetingelser til forskellige analyser. Den vigtigste forskel mellem gramfarvning og kultur er deres funktion; gram sil en farvningsteknik af bakterier, hvor kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer.

INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er Gram Stain
3. Hvad er kultur
4. Sammenligning side ved side - Gram Stain vs Culture
5. Resume

Hvad er Gram Stain?

Gramfarvning er en vigtig differentiel farvningsteknik, der bruges til bakterieidentifikation i mikrobiologi. Denne teknik blev introduceret af den danske bakteriolog Hans Christian Gram i 1884. Gramfarvning kategoriserer bakterier i to hovedgrupper: gram positiv og gram negativ; disse er meget vigtige i bakterieklassificering og identifikation. Gramfarvning udføres som et indledende trin til bakteriekarakterisering.

Bakterier er grupperet baseret på forskellene i deres cellevæg. Gram-positive bakterier indeholder et tykt peptidoglycan-lag i deres cellevæg, mens gram-negative bakterier indeholder et tyndt peptidoglycan-lag i deres cellevæg som vist i figur 01. Resultatet af gramfarvningen vil være baseret på tykkelsesforskellen i peptidoglycan-laget i cellevæg.

Figur 1: Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier

Gramfarvning udføres under anvendelse af fire forskellige reagenser, nemlig; primær plet, mordant, affarvningsmiddel og modfarvning. Krystallviolet og safranin tjener som henholdsvis primær- og modfarvning, mens gram jod og 95% alkohol tjener som henholdsvis mordanten og affarvningsmidlet.

Grundlæggende trin med gramfarvning

En bakteriel udstrygning fremstilles på et rent glasglas, fastgøres og afkøles.
Udtværing oversvømmes med krystalviolet i 1-2 minutter.
Udstrygning skylles med langsomt rindende vand fra vandet for at fjerne overskydende pletter.
Gram iod påføres udstrygningen i 1 minut.
Udstødning skylles med langsomt rindende vand fra vandet
Udstrygning vaskes med 95% alkohol i 2 - 5 sekunder og skylles med langsomt rindende vand fra hanen.
Udstrygning farves med safranin i 1 minut
Udstrygning skylles med langsomt kørende vand fra vandet, tørres og observeres under mikroskopet.

Ved afslutningen af gramfarven observeres gramnegative bakterier i lyserød farve, mens de gram positive bakterier observeres i lilla farve som vist i figur 02. Resultatet af gramfarven bestemmes af tykkelsen af det peptidoglycan lag i deres cellevæg. Under affarvningstrinnet fjernes primær farvning og mordanten let fra de gramnegative bakterier og bliver farveløse, da de har et tyndt peptidoglycanlag. Den primære plet bevares i de gram-positive bakterier, da de har et tykt peptidoglycan-lag. Modfarvning vil ikke være effektiv for gram positive bakterier på grund af tilbageholdelsen af den primære plet. Så gram positive bakterier vil være synlige i primær farvefarve, dvs. lilla farve. Modpletter pletter de gramnegative bakterier og vil være synlige i plukfarve, der er safraninfarve. Derfor er det let at kategorisere bakterier i to grupper efter gramfarven, og det er værdifuldt ved bakteriedifferentiering og identifikation.

Figur 2: Gram Strain

Hvad er kultur?

Mikrobiel kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer under laboratoriebetingelser til forskellige formål. Kulturer dyrkes i faste, halvfaste og flydende medier baseret på typen og formålet med mikroorganismedyrkningen. Kulturer forsynes med nødvendige næringsstoffer og vækstbetingelser krævet af mikroorganismerne. Der er forskellige komponenter i et dyrkningsmedium såsom energikilde, kulstofkilde, nitrogenkilde, mineraler, mikronæringsstoffer, vand, størkningsmiddel osv. Optimal temperatur, ilt og pH-værdi bør justeres i henhold til typen af dyrket mikroorganisme.

Der er forskellige typer mikrobielle kulturer; for eksempel batchkultur, kontinuerlig kultur, stavkultur, agarpladekultur, bouillonkultur osv. I henhold til sammensætningen af det voksende medium er der forskellige typer kulturmedier kendt som syntetiske medier, halvsyntetiske medier og naturlige medier. Mikrobielle kulturer fremstilles under sterile forhold i et specielt kammer, der kaldes laminær luftstrøm. Dyrkningsmedium og glasvaren steriliseres inden inokulering af den ønskede mikroorganisme. Under passende sterile betingelser overføres målmikroorganisme til det steriliserede næringsmedium og inkuberes ved optimal temperatur. Inde i mediet vil mikroorganismen vokse og formere sig ved hjælp af de medfølgende næringsstoffer.

Figur 3: En bakteriekultur på pladen

Hvad er forskellen mellem Gram Stain og Culture?

Gram Stain vs Culture
Gram-stamme er en differentieret farvningsteknik, der anvendes til bakteriedifferentiering og identifikation.	Mikrobiel kultur er en metode til vækst af mikroorganisme i laboratoriet.
komponenter
Dette bruger forskellige reagenser, herunder to pletter.	Dette bruger forskellige kulturmedier såsom faste, halvfaste og flydende medier sammensat af næringsstoffer og andre nødvendige betingelser.
Grundlæggende funktioner
Dette gør det muligt at gruppere bakterier i to grupper: gram negative og gram positive.	Dette tillader multiplikation af mikroorganismer til forskellige formål.
Base
Gram-pletresultat er baseret på forskellene i det peptidoglycan lag af cellevæggen.	Mikroorganismer vil vokse og formere sig inde i kulturmediet.
Resultat
Gram-negative bakterier er synlige i lyserød farve, og gram-positive bakterier er synlige i lilla farve.	På plader kan der ses kolonier af mikroorganismer. På flydende medier er mikroorganismer i suspenderet form.

Resume - Gram Stain vs Culture

Mikrobielle kulturer fremstilles og opretholdes under laboratoriebetingelser til forskellige formål såsom opbevaring, testning, kemisk oprensning osv. Gramfarvning er en farvningsprocedure, der differentierer bakterier i to hovedgrupper kaldet gram negative bakterier og gram positive bakterier. Derfor er forskellen mellem gramfarvningen og kulturen, at gramfarvning er en farvningsteknik af bakterier, mens kulturen er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer i laboratorierne.

Reference:
1. Aryal, Sagar. "Gramfarvning: princip, procedure, fortolkning, eksempler og animation." Online mikrobiologi noter. N.p., 20. september 2015. Web. 1. mar. 2017.
2. "Mikrobiologisk kultur." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 1. februar 2017. Web. 1. mar. 2017
3. Kumar, Sabarish. "Hvad er de grundlæggende teknikker inden for mikrobiel kultur?" Hvad er de grundlæggende teknikker i mikrobiel kultur? N.p., n.d. Web. 1. mar. 2017

Billede høflighed:
1. “Gram-Cell-wall” Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Gram Strain” Af Y tambe - Y tambe's fil (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
3. “Anthrax Culture” Af U.S. Army Medical Research Institute of Infectious Diseases foto - (Public Domain) via Commons Wikimedia

Videnskab & natur