Forskellen mellem HPLC og Fast HPLC

Det vigtigste forskel mellem HPLC og hurtig HPLC er det pumpetrykket, som vi bruger til HPLC, er omkring 40 MPa, mens pumpetrykket til hurtig HPLC er omkring 3-5 MPa.

Den mest almindelige teknik, som vi bruger til at separere komponenter i en blanding, er "væskekromatografi". Der er flere teknikker til at nå dette formål, hvorfra HPLC er meget populær. HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, der identificerer, kvantificerer og adskiller komponenter i en flydende blanding på en hurtig og effektiv måde. Hurtig HPLC er en speciel anvendelse af HPLC, som sent har fanget opmærksomheden hos dem, der er involveret i studiet af løsninger.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er HPLC
3. Hvad er hurtig HPLC
4. Sammenligning side ved side - HPLC vs Hurtig HPLC i tabelform
5. Resume

Hvad er HPLC?

HPLC er højtydende væskekromatografi. Den bruger et højt tryk for at skubbe opløsningsmidler, så de passerer gennem en søjle. Det er også en ideel måde at adskille og undersøge forskellige forbindelser såsom aminosyrer, nukleinsyrer, kulhydrater, steroider, antibiotika og kulbrinter. HPLC har mange fordele i forhold til andre metoder til separering af blandinger, såsom højere opløsning og hurtigere analyse. Det udsletter behovet for ompakning og regenerering og giver bedre kontrol over parametre og dermed øger effektiviteten af ​​adskillelsen. Ideelt set passer HPLC til store applikationer, da det kan adskille meget små partikler og tillader anvendelse af høje tryk, der gør det nemt for opløsningsmidler at flyde let.

Figur 01: HPLC-kolonne

Kort sagt er fremgangsmåden til drift af HPLC-teknikken som følger. Først skal vi introducere prøven i strømmen af ​​mobilfase i adskilte små mængder ved hjælp af en pumpe. Pumpetrykket skal holdes på 40 MPa. Denne strøm af mobilfase perkolererer gennem HPLC-søjlen. Derefter passerer komponenterne i prøven også gennem kolonnen. Deres bevægelseshastigheder adskiller sig imidlertid fra hinanden på grund af forskellen i interaktioner mellem prøvekomponenterne og adsorbenten inde i søjlen. Vi kalder dette adsorbent som den stationære fase, fordi det befinder sig inde i søjlen (ikke bevæger sig). Derefter kan vi i slutningen af ​​søjlen opsamle prøven, der elueres fra søjlen, hvorved vi kan opsamle komponenterne i prøven separat.

Hvad er hurtig HPLC?

For nylig udviklede forskere ved Schering Plough-forskningsinstituttet en hurtig HPLC-teknik, der er en avanceret version af HPLC, da det muliggør endnu hurtigere adskillelse af forbindelser fra en blanding. Også kendt som hurtig HPLC gør denne teknik brug af en 2,7um smeltet kerne-silicapartikler, der er fremstillet ved at smelte 0,5um porøs silica over en fast silica-partikel. Disse unikt fremstillede partikler gør proceduren for adskillelse meget hurtig og det også ved lavt modtryk end det, vi bruger i HPLC.

Figur 02: FPLC-apparat

Hurtig HPLC får resultater, der kan sammenlignes med UPLC, men forskere mener, at denne teknik er overlegen, da den ikke kræver meget dyre ultrahøjtryksudstyr. Det, der er fantastisk, er, at hurtig HPLC ikke kræver nye laboratorieprotokoller.

Hvad er forskellen mellem HPLC og Fast HPLC?

HPLC er højydelsesvæskekromatografi og hurtig HPLC er en avanceret form for højydelsesvæskekromatografi. Den vigtigste forskel mellem HPLC og hurtig HPLC er, at pumpetrykket, som vi bruger til HPLC, er omkring 40 MPa. Der henviser til, at pumpetrykket for hurtig HPLC er omkring 3-5 MPa. Desuden kan vi adskille forskellige forbindelser, såsom aminosyrer, nukleinsyrer, kulhydrater, steroider, antibiotika og kulbrinter under anvendelse af HPLC-teknikken, mens den hurtige HPLC-teknik hovedsageligt bruges til separering af proteiner.

Nedenstående infografik giver mere information om forskellen mellem HPLC og hurtig HPLC.

Resume - HPLC vs Fast HPLC

HPLC er en teknik til flydende kromatografi, der er blevet meget populær overalt i verden. Hurtig HPLC er en ny version af HPLC, forskere ved Schering Plough Institute udviklede denne nye teknik. Den vigtigste forskel mellem HPLC og hurtig HPLC ligger på det pumpetryk, som vi bruger til adskillelsen. Det er; pumpetrykket, som vi bruger til HPLC, er omkring 40 MPa. Men pumpetrykket for hurtig HPLC er omkring 3-5 MPa.

Reference:

1. "Flydende kromatografi med høj ydeevne." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. oktober 2018. Tilgængelig her 
"Du har brug for et fancy system for at køre hurtig HPLC - eller gør du det?" Hurtig HPLC - CHROMacademy. Tilgængelig her  

Billede høflighed:

1. ”HPLC kolom” Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) via Commons Wikimedia  
2. ”Lab's FPLC” Af Stephen Helms fra Dallas, TX, USA - Our Lab's FPLC, (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia