Forskel mellem in situ-hybridisering og immunohistokemi

Nøgleforskel - Hybridisering i situation vs immunohistokemi
 

Diagnostik af kræft og infektionssygdomme er en populær tendens, hvor nye proteomics og genomics-baserede teknikker anvendes til at identificere tumorer eller infektiøse celler, dens spredning og stederne for celleudvikling og analyse af det genetiske grundlag for mest overførbare og ikke-smitsomme sygdomme. Dette vil resultere i nøjagtig behandling og design af medikamenter og udvikling af tilpassede terapier til sygdomme. In situ-hybridisering (ISH) og immunohistokemi (IHC) er to sådanne vidt anvendte teknikker inden for kræftbiologi, og den vigtigste forskel mellem in situ-hybridisering og immunokemi ligger i molekylerne, der anvendes i analyseproceduren. I ISH anvendes nukleinsyreproberne til analyse, hvorimod i IHC anvendes monoklonale og polyklonale antistoffer til de diagnostiske bestemmelser.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er der i hybridisering
3. Hvad er immunohistokemi
4. Ligheder mellem hybridisering i situation og immunohistokemi
5. Sammenligning side om side - Hybridisering i situation vs immunohistokemi i tabelform
6. Resume

Hvad er in situ-hybridisering (ISH)?

In situ hybridisering er en nukleinsyrehybridiseringsteknik, der udføres direkte på en del eller del af væv, i hele vævet eller i celler. Teknikken afhænger af teorien om Watson Crick komplementær baseparring, hvilket resulterer i enten DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider, som kan detektere muterede gener eller identificere det krævede gen af ​​interesse. Enkeltstrengede DNA-sekvenser, dobbeltstrengede DNA-sekvenser, enkeltstrengede RNA-sekvenser eller syntetiske oligonukleotidsekvenser anvendes som prober under hybridiseringsteknik, og disse prober er mærket med en radioaktiv fosfor ved dens 5'-ende til identifikationsprocedurer ved autoradiografi eller mærket under anvendelse af fluorescerende farvestoffer . Der er forskellige typer ISH-teknikker tilgængelige baseret på den anvendte sonde og den type visualiseringsteknik, der blev fulgt.

Figur 01: Fluorescerende in situ-hybridisering

Der er mange anvendelser af ISH, hovedsageligt i molekylær diagnostik af infektionssygdomme for at identificere tilstedeværelsen af ​​patogener og for at bekræfte patogenet via molekylær diagnostik. Det bruges også inden for udviklingsbiologi, karyotyping og fylogenetisk analyse og fysisk kortlægning af kromosomer.

Hvad er immunhistokemi (IHC)?

I IHC-teknikken er det analyserede hovedmolekyle antigenet. Under IHC anvendes monoklonale og polyklonale antistoffer til at bestemme tilstedeværelsen af ​​antigener efter infektion eller malign celleproliferationsstatus. Teknikken er baseret på antigen-antistofbinding, og enzymmærker anvendes til denne teknik; en sådan anvendelse er ELISA (enzymbundet immunosorbentassay). Markørerne kan også være fluorescerende mærkede antistoffer eller radiomærkede antistoffer.

Figur 02: Immunohistokemi

IHC er vidt brugt til påvisning af kræftceller. De diagnostiske procedurer er rettet mod antigenerne, der er til stede på tumorcellerne, for at identificere og karakterisere tumoren. Den samme procedure er inkorporeret til diagnosticering af infektionsmidler. Monoklonale og polyklonale antistoffer anvendes også til at analysere forskellige genprodukter ved at muliggøre antistof-antigen-bindingsreaktion mellem det ønskede protein og det syntetiske antistof, der administreres.

Hvad er lighederne mellem hybridisering i situation og immunohistokemi?

• ISH og IHC er yderst specifikke reaktioner.
• Begge teknikker er meget nøjagtige.
• Begge teknikker kan anvendes til diagnosticering af kræft og infektionssygdomme.
• Disse teknikker udføres i sterile in vitro-miljøer.
• Begge er hurtige teknikker, der giver reproducerbare resultater.
• ISH og IHC anvender detektionsmetoder, såsom radiomærkning og fluorescens teknikker.

Hvad er forskellen mellem Hybridisering i situation og immunohistokemi?

In situ-hybridisering vs immunohistokemi
ISH er en nukleinsyrehybridiseringsteknik, der udføres direkte på en del eller del af vævet eller hele vævet.	IHC er en teknik, hvor monoklonale og polyklonale antistoffer anvendes til at bestemme tilstedeværelsen af ​​antigener, som er specielle proteinmarkører placeret på celleoverfladerne.
Type af biomolekyler analyseret
ISH analyserer nukleinsyrer.	IHC analyserer proteiner-antigener.
Grundlag for biokemisk reaktion
Komplementær baseparring mellem DNA-DNA eller DNA-RNA forekommer i denne teknik.	Antigen-antistof-interaktioner er involveret i immunohistokemi.
Enzymbundne detektionsmetoder
Enzymbundne detektionsmetoder kan ikke bruges i ISH.	Enzymbundne detektionsmetoder kan bruges i IHC.

Resumé - In situ hybridisering vs immunohistokemi

Molekylær diagnostik er hurtige og bekræftende metoder, der kan anvendes til at identificere en ikke-smitsom sygdom, såsom kræft eller smitsom sygdom, såsom HIV eller tuberkulose, baseret på de molekylære markører, der findes på cellerne, som fører til manifestationen af ​​sygdommen. Molekylære markører kan være til stede i form af udtrykte proteiner eller på det genetiske niveau baseret på, hvor forskellige nye teknikker introduceres for at øge effektiviteten og er mindre besværlige, skønt der er høje omkostninger involveret i disse teknikker. Således afhænger ISH af DNA-DNA eller DNA-RNA-hybriddannelse, og IHC afhænger af de specifikke reaktioner mellem antistof og antigen. Dette er forskellen mellem hybridisering in situ.

Download PDF-version af in situ-hybridisering vs immunohistokemi

Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offline-formål som pr. Citatnotat. Download PDF-version her Forskel mellem in situ-hybridisering og immunohistokemi.

Referencer:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Anvendelser af immunohistokemi." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, tilgængelig her. Åbnede 24. august 2017.
2. "In situ hybridisering (ISH)." National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine, tilgængeligt her. Åbnede 24. august 2017.

Billede høflighed:

1. “FISH (fluorescerende i situationen hybridisering)” Af MrMatze - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Immunohistochemicalstaining2” af Imoen på den engelske sprog Wikipedia (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia