Forskellen mellem omvendt fase og normal fase HPLC

Det vigtigste forskel mellem omvendt fase og normal fase HPLC er, at omvendt fase HPLC bruger en polær stationær fase og en mindre polær mobil fase, mens den normale fase HPLC bruger en ikke-polær stationær fase og en polær mobil fase.

Den normale fase HPLC er den ældste HPLC-teknik, som Tswett anvendte i sine separationer af planteekstrakter; han brugte kridt i en glaskolonne. Dette var den klassiske kromatografiske tilstand, der førte til at navngive den som den "normale" teknik. Omvendt fase HPLC er derimod det modsatte af den normale teknik, som forskere har udviklet for nylig.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er omvendt fase HPLC
3. Hvad er normal fase HPLC
4. Sammenligning side ved side - omvendt fase vs normal fase HPLC i tabelform
5. Resume

Hvad er omvendt fase HPLC?

Reverse-fase HPLC er en kromatografisk teknik, hvor vi bruger en hydrofob stationær fase. Blandt alle HPLC-metoder bruger vi denne metode til cirka 70% på grund af dens brede anvendelighed og reproducerbarhed. Den stationære fase er ikke-polær, og den mobile fase er polær.

De fleste af de gange bruger forskere en vandig blanding af vand med et blandbart, polært organisk opløsningsmiddel, såsom acetonitril eller methanol som den mobile fase. Derfor interagerer analytterne med den ikke-polære stationære fase.

Hvad er normal fase HPLC?

Normal fase HPLC er en kromatografisk teknik, hvor vi bruger en hydrofil stationær fase. Det er den traditionelle metode til HPLC, skønt vi ikke bruger den så meget. Den stationære fase er polær, og den mobile fase er ikke-polær. Mere vigtigt er, at den mobile fase af denne teknik er 100% organisk. Det betyder, at der ikke anvendes noget vand til dette.

Figur 01: En prøveprofil for normal fase og omvendt fase HPLC-kromatogrammer i henhold til polariteten af ​​komponenter i analytten.

Den stationære fase indeholder typisk silica, cyano, diol, aminobindede faser osv. Mobilfaser inkluderer organiske opløsningsmidler, såsom hexan, ethylacetat osv. Denne teknik baserer sig på tilbageholdelse af opløsningsmiddel eller analytmolekyler på den polære stationære fase.

Hvad er forskellen mellem omvendt fase og normal fase HPLC?

Reverse-fase HPLC er en kromatografisk teknik, hvor vi bruger en hydrofob stationær fase. Den stationære fase af denne teknik er ikke-polær. Den stationære fase er ikke-polær, mens den mobile fase er polær. Desuden bruger forskere en vandig blanding af vand med et blandbart, polært organisk opløsningsmiddel, såsom acetonitril eller methanol som den mobile fase i omvendt fase HPLC. Mens den normale fase HPLC er en kromatografisk teknik, hvor vi bruger en hydrofil stationær fase. Den stationære fase af denne teknik er polær. Den stationære fase er polær, mens den mobile fase er ikke-polær. Derudover bruger forskere organiske opløsningsmidler som hexan, ethylacetat osv. Som den mobile fase af normal fase HPLC. Nedenstående infografik viser forskellen mellem omvendt fase og normal fase HPLC i tabelform.

Resume - Reverse Phase vs Normal Phase HPLC

Reverse-fase og normal fase HPLC-teknikker er to væskekromatografiske teknikker. Forskellen mellem revers fase og normal fase HPLC er, at revers fase HPLC bruger en polær stationær fase og en mindre polær mobil fase, hvorimod normal fase HPLC bruger en ikke-polær stationær fase og en polær mobil fase.

Reference:

1. Vand. “HPLC-separationstilstande.” HPLC - High Performance Liquid Chromatography Explained: Waters. Tilgængelig her