De fleste forskningsundersøgelser involverer dyrecelleavl, og derfor kræver disse undersøgelser vedligeholdelse af dyrefællelinjer under specielle vækstbetingelser. Dyrecelleodling udføres vidt i farmakologiske undersøgelser for at identificere lægemiddelmetabolisme, sygdomsdiagnostik og kræftforskning. Cellekulturmediet er et vigtigt aspekt af dyrecellekultur. Dulbeccos modificerede Eagle Medium (DMEM) og Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) er to dyrkningsmedier, der anvendes til dyrkning af dyreceller. RPMI er et medie, der vidt bruges til at dyrke pattedyrceller i suspensionskultur. DMEM er en modificeret type basalmedium med øgede aminosyre- og vitaminkoncentrationer op til en firedobling. DMEM anvendes til dyrkning af celler i vedhæftede kulturer. Den vigtigste forskel mellem de to medier er medietypenes kultur. RPMI anvendes på suspensionskulturer, medens DMEM bruges til at dyrke adhærerende celler.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er RPMI
3. Hvad er DMEM
4. Ligheder mellem RPMI og DMEM
5. Sammenligning side ved side - RPMI vs DMEM i tabelform
6. Resume
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium kaldes også RPMI 1640. Mediets navn blev afledt af det institut, hvor medierne blev opdaget. Dette medie er almindeligt anvendt i dyrecellekultur, især til vækst af pattedyrceller. De blev oprindeligt udviklet til at dyrke humane lymfocytter.
Følgende ingredienser er inkluderet i RPMI.
Det særlige ved RPMI er den øgede koncentration af fosfat i mediet. RPMI bruges i en 5% kuldioxidatmosfære. Dette vil give de maksimale og optimale betingelser for cellevæksten. PH i medierne holdes på 8,0 af bicarbonatbuffersystemet.
Figur 01: Cellekultur på en petriskål
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) er et modificeret medium, der er kommercielt fremstillet. Den originale struktur af det medium pulver er gul. I DMEM øges vitaminkoncentrationen op til firedoblet, hvorved næringsindholdet i mediet øges.
DMEM modificeres også ved at tilsætte flere salte, såsom ferri nitrat, natriumpyruvat og nogle ikke-essentielle aminosyrer, såsom serin og glycin. Formuleringen af glukose i medierne ændres også. Den oprindelige formulering er sammensat af 1000 mg / L glucose, mens koncentrationen i DMEM øges op til 4500 mg / L. DMEM kræver også tilskud af et serummedium, da det ikke er et komplet medium. Oftest suppleres DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS tilvejebringer de krævede proteiner og vækstfaktorer til dyrkningsprocessen.
PH i mediet varierer ved tilsætning af natriumbicarbonat. pH i mediet før tilsætning af natriumbicarbonat er omkring 6,80 - 7,40, medens pH efter tilsætning af natriumbicarbonat ligger i området 7,60 - 8,20. Opbevaringstemperaturen for mediet er 2-8 0C.
Figur 02: DMEM
RPMI vs DMEM | |
RPMI er et medium, der vidt bruges til at dyrke pattedyrceller i en suspensionskultur. | DMEM er en modificeret type basalmedium med øgede aminosyre- og vitaminkoncentrationer. |
Tilstedeværelse af ekstra fosfater | |
Til stede i RPMI. | Fraværende i DMEM. |
Brug | |
| Bruges til at dyrke celler i vedhæftede kulturer. Det er vant til,
|
Typer af kultur | |
RPMI bruges til suspensionskulturer. | DMEM bruges til kulturer med celle vedhæftet. |
Både RPMI og DMEM er vidt brugt i dyrecelleavl, især til dyrkning af dyrecellelinier inklusive lymfocytter in vitro. DMEM er et modificeret basalmedium, hvor der er en øget næringsstofkoncentration. RPMI udviklet af Roswell Park Memorial Institute, og det er også et medium, der anvendes i dyrecellekultur, især til pattedyrs lymfocytter. Begge medier er kommercielt tilgængelige. Dette er forskellen mellem RPMI og DMEM.
1. "RPMI Media - RPMI-1640 Media." Sigma-Aldrich. Tilgængelig her
2. "Dulbecco's Modified Eagle's Medium - DME, DMEM." Sigma-Aldrich. Tilgængelig her
1.'Cell Culture in a small Petri dis'By kaibara87 - oprindeligt sendt til Flickr som Cell Culture, (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia
2.'DMEM cellekulturmedium'By Lilly_M - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia