Det vigtigste forskel mellem det samlede celletal og det levedygtige celletal er det samlet celletal estimerer alle celler inklusive både levende og døde mikrobielle celler i en prøve, mens levedygtigt celletal kun estimerer de levende mikrobielle celler i en prøve.
At tælle antallet af organismer inden for en population anses for nødvendigt for det meste af eksperimentelt arbejde. Derfor forsøger vi at analysere antallet af mikrober i en prøve ved hjælp af direkte og indirekte metoder. Direkte målinger involverer metoder, der tæller cellenumre direkte. Indirekte målinger involverer måling af en eller anden parameter, der kan relateres til celletal, såsom celletæthed, tørvægt osv. Nogle metoder kvantificerer kun de levende mikrobielle celler i en prøve. Levedygtig celletælling er en sådan metode. Direkte mikroskopiske tællinger kvantificerer alle celler i et kendt volumen af medium / prøve ved hjælp af et mikroskop. Derfor tæller det både levende og døde celler. Det er en type af et samlet celletælling.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er det samlede celleantal
3. Hvad er levedygtig celletælling
4. Ligheder mellem total celletælling og levedygtig celletælling
5. Sammenligning side ved side - Total celletælling vs levedygtig celletælling i tabelform
6. Resume
Samlet celletælling er den metode, der involverer tælling af alle celler i et kendt volumen af medium / prøve ved hjælp af et mikroskop og et tællekammer (hæmocytometer). I modsætning til levedygtige tællinger tælles både levende og døde celler. Derfor er dette et samlet antal, medmindre der anvendes en levedygtighedsfarvning under observationen. Ved mikroskopi observeres cellerne direkte under mikroskopet og tælles. Den bruger en cellesuspension, der består af mikrobielle celler. For let at tælle og nøjagtige målinger kan fortynding af prøven udføres. I meget høje / lave koncentrationer af celler er det en vanskelig opgave at opnå det samlede celletal ved hjælp af et mikroskop.
Figur 01: Tællekammer - hæmocytometer
Tællekamre er nemme, billige og hurtige til at tage et samlet celletælling. Det vigtigste er, at tællekamre er nyttige til at tælle både eukaryoter og prokaryoter. Vi tæller celler i udvalgte firkanter med kendt volumen for at kvantificere det totale celletal.
Levedygtig celletælling er en metode til at tælle levende mikrobielle celler i en prøve. Det tæller kun levende celler i prøven. Levedygtigt pladetælling, membranfiltrering og mest sandsynligt antal er få levedygtige celletællingsteknikker. Disse tilgange er vækstbaseret. Levedygtig pladetællingsmetode er en kraftfuld metode, der anvendes inden for mange mikrobiologiske områder, herunder fødevare- og mejerimikrobiologi, medicinsk mikrobiologi, miljømikrobiologi, mikrobiel genetik, udvikling af vækstmedier og bioteknologi.
Den mest almindelige måde at tælle levedygtige bakterier er at bruge en prøve, der er i stand til at danne kolonier på et agarmedium. Der er to hovedmåder til at udføre en pladetælling: spredningspladeteknik og hældepladeteknik. Et kendt volumen af prøven kan enten spredes på overfladen af en agarplade eller blandes i agaren. Pladen inkuberes derefter, og de opstående kolonier tælles. Antallet af kolonier er relateret til antallet af mikroorganismer i den oprindelige prøve. Levedygtige tællinger måler kun de celler, der lever og vokser.
Figur 02: Antal levedygtige plader
Det mest sandsynlige antal (MPN) er et alternativ til pladetællingsmetoder til estimering af befolkningstætheden af levedygtige celler. Det tæller organismer, der vokser i flydende kultur og er således en overvejende bakteriologisk teknik. Det er især nyttigt til lave koncentrationer af organismer, f.eks. mælk, drikkevand.
Membranfiltreringsteknik er mere velegnet, når mikrober er meget fortyndede som i en bys vandforsyning. Det gøres simpelthen ved at føre et kendt volumen af væsken gennem et filter og inkubere det på et næringsmedium. Kolonier, der udvikler sig på filteret, tælles, og bakterierne pr. Ml af prøven beregnes.
Det samlede celletælling optæller alle levende og døde mikrobielle celler i en prøve. I modsætning hertil optæller levedygtigt celletal kun de levende celler i en prøve. Så dette er nøgleforskellen mellem total celletælling og levedygtig celletælling. Total celletælling er uafhængig af væksten af kolonier på agarplader, medens levedygtigt celletal er en vækstbaseret teknik, og det afhænger af væksten af mikrobielle kolonier på agarplader.
Nedenstående infografik opsummerer forskellen mellem total celletælling og levedygtig celletælling.
Det samlede celletælling optæller både levende og døde mikrobielle celler, mens levedygtigt celletal kun optæller de levende celler. Dette er således nøgleforskellen mellem total celletælling og levedygtig celletælling. Levedygtigt celletælling er også en vækstbaseret teknik i modsætning til det samlede celletal. Desuden kræver det inkubering af plader, indtil de synlige kolonier får. Levedygtig pladetælling, MPN og membranfiltrering er få teknikker til levedygtigt celletælling, medens direkte mikroskopi og anvendelse af hæmocytometer er to teknikker til total celletælling.
1. "Tælle bakterier." Lumen, tilgængelig her.
1. “Hemocytometer” af Todd - oprindeligt sendt til Flickr som 0356 (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia
2. “Verdünnungsreihe mit Ausplattieren” Af Leberechtc - Eget arbejde (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia