Transformation vs Transfektion
Transformation og transfektion er to enkle teknikker, der anvendes til at introducere et fremmed gen i en værtscelle. Disse teknikker afhænger imidlertid af typen af vært- eller vektorsystemer.
Hvad er celletransformation?
Transformation er den teknik, der anvendes til at introducere gener i gær- og bakterieceller. Denne teknik forårsager normalt arvelige ændringer i gener, og dermed er ekspressionen af genet permanent. Bakterietransformationen blev først introduceret i 1928 af Frederick Griffith. I begyndelsen af 1970'erne blev denne teknik brugt i E coli. Under processen med transformation af E coli, cellerne blødgøres i iskold opløsning af CaCl2. Dette trin gør E coli celler kompetente. Derefter blandes de kompetente celler med plasmid-DNA og inkuberes på is i 20-30 minutter. Derefter gives et kort varmechok for at muliggøre overførsel af DNA ind i cellen. Endelig anbringes cellerne i en næringsmedium og inkuberes ved 37 ° C i 60-90 minutter for at etablere plasmiderne. Når disse trin er fuldført, kan de transformerede celler placeres på et passende medium til formering af celler. Da transformation betragtes som en ineffektiv teknik, kan den muligvis ikke bruges til forberedelse af klonbanker.
Hvad er celletransfektion?
Transfektion er en metode til introduktion af et fremmed gen, normalt, i pattedyrceller. Der er to metoder til transfektion; nemlig transient transfektion og stabil transfektion. Ved kortvarig transfektion er genekspression tilgængelig i en begrænset periode; således forårsager ændringen af genet midlertidig ekspression. Denne transfektionsmetode er enkel og hurtig; derfor kan det bruges rutinemæssigt. En ulempe ved transient transfektion er vanskeligheden ved at anvende til proteinsyntesesystemer i stor skala.
Under stabil transfektion er et målgen integreret i værtscellens genom, og genetekspressionen er således permanent, i modsætning til den kortvarige transfektion.
Hvad er forskellen mellem transformation og transfektion?
• Transformation er introduktion af et gen i en prokaryot celle (bakterie og gær), mens transfektion normalt kaldes introduktion af et gen i en pattedyrscelle.
• Transformation resulterer i arvelig ændring i gener, mens transfektion kan resultere i enten midlertidig ekspression eller permanente ændringer i gener.