Kolonidannende enhed (CFU) og Mest sandsynligt antal (MPN) er to metoder, der anvendes til at opregne mikroorganismer i prøver. Begge parametre bruges til at detektere vandkvalitet og fækal indikatorbakterier i vandprøver. Kolonidannende enhed er et mål, der bruges til at opregne antallet af levedygtige bakterieceller eller svampeceller i specifik volumen eller vægt af en given prøve. Standardenheden for denne parameter er CFU / ml eller CFU / g. Det mest sandsynlige antal er en anden enhed, der bruges til at måle antallet af levedygtige bakterieceller i en flydende prøve. Den vigtigste forskel mellem CFU og MPN er den CFU beregnes ud fra bakterie- og svampekolonier, der vokser på en fast agarplade mens MPN beregnes ud fra levedygtige bakterier, der vokser i et flydende medium.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er CFU
3. Hvad er MPN
4. Sammenligning side ved side - CFU vs MPN i tabelform
5. Resume
Kolonidannende enhed (CFU) er en parameter, der måler antallet af levedygtige bakterie- eller svampeceller i en given prøve. Metoden, der tæller kolonidannende enheder, kaldes standard pladetælling. De levedygtige kolonier, der vises på agarpladerne, udtrykkes som CFU pr. 1 ml (kolonidannende enhed pr. Ml) af prøven til væsker eller CFU pr. 1 g (kolonidannende enhed pr. Gram) af prøven til faste stoffer.
Der er to almindelige metoder, der bruges til at måle CFU i en prøve. De er metode til spredningsplade og Hæld plade metode. Disse to metoder understøttes af en teknik kaldet seriel fortynding. Serielt fortyndede prøver muliggør opnåelse af et talt antal kolonier på agaroverfladen. Et kendt volumen af prøven kan spredes på overfladen af en agarplade eller blandes med agar og hældes på en plade. Pladen inkuberes derefter, og de opstående kolonier tælles. Antallet af kolonier angår antallet af mikroorganismer i den oprindelige prøve. Pladerne, der viser for mange kolonier eller for få kolonier, er udelukket fra at tælle, fordi resultaterne muligvis ikke er statistisk nøjagtige på disse plader. Statistisk set er det bedste interval 30 - 300 kolonier på en agarplade. Derfor skal de korrekte plader vælges til nøjagtig optælling. Seriel fortynding udføres for ovennævnte funktion.
Når du tæller antallet af levedygtige kolonier på plader, kan CFU / ml beregnes ved hjælp af følgende ligning.
CFU pr. Ml af den oprindelige prøve = antal kolonier på en plade X-fortyndingsfaktor
Fortyndingsfaktor = (1 / Fortynding af pladen)
For eksempel, hvis du får 149 kolonier på pladen af 10-4 fortynding, derefter kan antallet af bakterier i 1 ml af den oprindelige prøve beregnes som følger:
CFU / ml = (149) x (1/10-4)
= 149 × 104 eller 1490000
= 1. 49 x 106
Figur 01: Enhedsdannelse til koloni
Det mest sandsynlige antal er en alternativ foranstaltning til CFU / ml. MPN estimerer også de levedygtige celler i en flydende prøve. Det tæller organismer, der vokser i en flydende kultur og er en overvejende bakteriologisk teknik. Denne metode er især nyttig til prøver, der indeholder lave koncentrationer af bakterieceller; for eksempel udtrykkes mælk, drikkevand osv. MPN-værdi for 100 ml volumen. MPN er afhængig af en statistisk metode baseret på sandsynlighedsteori. Der er statistiske tabeller designet til at finde MPN-værdier pr. 100 ml af prøven. Disse tabeller viser resultaterne ved 95% konfidensgrænser.
MPN-værdi beregnes efter udførelse af en teknik kaldet multiple tube-fermenteringsmetode. Tre sæt rør indeholdende et passende dyrkningsmedium inokuleres med tre forskellige volumener af prøven, såsom 10 ml, 1 ml og 0,1 ml og inkuberes til vækst. Efter inkubationsperioden bedømmes rør + (positiv) eller - (negativ) for tilstedeværelse eller fravær af vækst. Mønsteret med positive og negative resultater sammenlignes derefter med en MPN-tabel med statistiske sandsynligheder for at estimere antallet af mikroorganismer. Derefter gives MPN-værdi for 100 ml af prøven. MPN er vidt brugt til at detektere coliforme bakterier, der er til stede i vandprøver.
Figur 02: MPN-tabel
CFU vs MPN | |
CFU er et mål, der bruges til at udtrykke antallet af levedygtige bakterie- eller svampekolonier i en given prøve. | MPN er et alternativt mål til CFU og måler antallet af levedygtige bakterieceller i en flydende prøve. |
Enhed | |
CFU / ml eller CFU / g | MPN / 100 ml |
Beregning | |
CFU beregnes ved at tælle antallet af kolonier, der er dyrket på agarplader. | MPN beregnes ved at sammenligne positive og negative mønstre af rørene med MPN-statistiske tabel. |
Seriefortyndingsteknik | |
Seriefortynding udføres, inden prøverne anbringes på agarplader. | Seriefortynding udføres normalt ikke, når MPN beregnes |
Metoder | |
Spredeplademetode og hældeplademetode er to typer metoder, der udføres for at opnå CFU. | Fermentering med flere rør er den metode, der udføres for at opnå MPN-værdi. |
Måling af mikrobiel vækst er påkrævet af mange grunde. I fødevareforarbejdningsanlæg er det nødvendigt at måle niveauet og typen af mikroorganismer i fødevarer. I fødevareindustrien og medicinen er det nødvendigt at sikre, at steriliseringsbehandlinger anvendes effektivt. I rensningsanlæg er det nødvendigt at tage mikrobielt antal rutinemæssigt. Ved optimering af proceduren inden for molekylærbiologi er det påkrævet at måle antallet af kolonier på plader. Derfor er der forskellige metoder til opregning og vækstmåling til rådighed. CFU og MPN er to sådanne metoder, der vidt bruges inden for forskellige områder. CFU er et mål for antallet af levedygtige bakterie- og svampekolonier, der er til stede i en given prøve. Det beregnes ved hjælp af standard pladetællingsmetode eller levedygtig pladetællingsmetode. MPN er et andet mål, der udtrykker antallet af bakterieceller, der er til stede i et givet volumen af den flydende prøve. Det beregnes ved anvendelse af multiple rørfermenteringsmetode og MPN-tabel. Dette er forskellen mellem CFU og MPN.
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offline-formål som angivet citatnotater. Download PDF-version her Forskel mellem CFU og MPN.
“Kolonidannende enhed.” Wikipedia. Wikimedia Foundation, 28. maj 2017. Web. Tilgængelig her. 1. juni 2017.
“Mikrobiologi - 014 - Mest sandsynlige antal.” Mikrobiologi - 014 - Mest sandsynlige antal | Mikrobiologi bacheloruddannelse. N.p., n.d. Web. Tilgængelig her. 1. juni 2017.
1.” Manuel CFU-tælling ”Af Quentin Geissmann - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “OSC Microbio 00 EE MPNTable” Af CNX OpenStax - (CC BY 4.0) via Commons Wikimedia