Immunocytochemistry (ICC) og Immunohistochemistry (IHC) er to vidt anvendte teknikker inden for molekylær diagnostik, som identificerer og bekræfter forekomsten af både ikke-kommunikative sygdomme og overførbare sygdomme baseret på de molekylære markører, der er til stede på celler. Den centrale forskel immunocytokemi og immunohistokemi er molekylet, der bruges som analyseprocedure i disse teknikker. I ICC anvendes primære og sekundære antistoffer konjugeret med markører, såsom fluorescens, hvorimod IHC, monoklonale og polyklonale antistoffer anvendes til den diagnostiske bestemmelse.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er immunocytokemi
3. Hvad er immunohistokemi
4. Ligheder mellem immunocytokemi og immunohistokemi
5. Sammenligning side ved side - Immunocytokemi vs immunohistokemi i tabelform
6. Resume
ICC bruger primære og sekundære antistoffer bundet til markører såsom fluorescerende markører eller enzymer og er en kraftfuld detektionsmetode til at detektere antigener, der er til stede på målceller, som enten kan være infektiøse cellulære partikler eller kræftformede tumorceller. Der kræves tre typer kontroller til immunocytokemi.
Figur 01: Immunocytochemistry mærker individuelle proteiner i celler (her er Tyrosinhydroxylase i aksonerne af sympatiske autonome neuroner vist i grønt).
Den primære antistofkontrol er specifik for hvert nyt antistof og kan ikke gentages for hvert eksperiment. Den sekundære antistofkontrol er designet baseret på det primære antistof anvendt i eksperimentet og er inkluderet i hvert eksperiment. Mærkningskontrollen er inkluderet, hvis en betingelse for proceduren ændres, prøven ændres, eller når uventet mærkning findes.
De to hovedanvendelser af ICC er Radio Immuno - Assay (RIA) og enzymbundet immunosorbentassay (ELISA). Det mest almindelige anvendte antistof er immunoglobulin G.
I immunohistokemi indeholder kildeprøven monoklonale og polyklonale antistoffer for at bestemme tilstedeværelsen af antigener i fremmede celler. Denne teknik er baseret på den specifikke reaktion af antigen-antistofbinding. Antistofferne anvendt til påvisning kan mærkes med forskellige markører; de kan være fluorescensmarkører, radiomærkede markører eller kemiske markører. Gennem lette in vitro binding mellem antigenet og det målrettede antistof, tilstedeværelsen eller fraværet af et bestemt protein i en celle kan bestemmes.
Figur 02: Immunohistokemisk farvning af normal nyre med CD10
I øjeblikket er forskere involveret i at udvikle målantistoffer for specifikke antigener, der er til stede i celler, der enten kan udvikle sig som ondartede tumorceller eller antigener, der er til stede i infektiøse midler såsom HIV.
Immunocytochemistry (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC) | |
ICC bruger primære og sekundære antistoffer bundne markører såsom fluorescerende markører eller enzymer og er en kraftfuld detektionsmetode til at detektere antigener til stede på målceller. | IHC er en metode, der bruger monoklonale og polyklonale antistoffer til at bestemme tilstedeværelsen af antigener, som er specielle proteinmarkører placeret på celleoverfladerne. |
Prøvekilde | |
Prøver afledt fra væv, der er blevet behandlet histologisk til tynde sektioner, anvendes i ICC. | IHC bruger prøver, der består af celler, der er dyrket i et monolag eller celler i suspension, der er deponeret på et objektglas. |
Prøvebehandling | |
I ICC skal celler være permeabel for at lette antistofpenetrering til de intracellulære mål. | I IHC er celler formalinfikserede, paraffinindlejrede før farvning. |
Molekylær diagnostik bruges til at identificere og bekræfte forekomsten af både ikke-overførbare sygdomme og overførbare sygdomme baseret på de molekylære markører, der findes på celler. Molekylære markører kan være proteiner eller sekvenser af DNA eller RNA; udvikling af teknologier som ICC og IHC har banet vejen for forskere til at identificere sygdommen og dens årsag på et tidligt tidspunkt. Både ICC og IHC afhænger af de specifikke reaktioner mellem antistof og antigen, selvom prøvekilden. Den største forskel mellem immunocytokemi og immunohistokemi er prøvebehandlingen af de to procedurer.
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offline-formål som pr. Citatnotat. Download PDF-version her Forskel mellem immunocytokemi og immunohistokemi.
1. Burry, Richard W. “Kontroller for immunocytokemi: En opdatering.” Journal of Histochemistry and Cytochemistry, SAGE Publications, Jan. 2011, tilgængelig her. Åbnede 24. august 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Anvendelser af immunohistokemi." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, tilgængelig her. Åbnede 24. august 2017.
1. “Immunohistochemistry” af Swharden - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Kidney cd10 ihc” Af Nephron - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia