Det vigtigste forskel mellem knock-in og knockout er afhængig af metoden, der bruges til at skabe en transgen organisme. Ved genudfoldning finder indsættelse af et nyt gen sted, mens der ved genetisk knockout finder fjernelse af et eksisterende gen sted for at skabe en transgen organisme.
Transgene organismer er organismer med en ændret genetisk sammensætning. 'Rekombinante organismer' er et synonym for dem. I de fleste tilfælde indeholder transgene organismer fordelagtige egenskaber. Når man opretter transgene organismer, bliver gener målet. Efter behov kan et gen introduceres eller fjernes. Gen-knock-in refererer til introduktionen af et nyt gen, mens gen-knockout refererer til fjernelse af et gen.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er Knock In
3. Hvad er Knockout
4. Ligheder mellem Knock In og Knockout
5. Sammenligning side ved side - Knock In vs Knockout i tabelform
6. Resume
Knock in, eller gen-knock-in, er processen med at indsætte et nyt gen i en organisme. Det indsatte gen skal være funktionelt ved indsættelse. Forskellige genteknologiteknikker udfører processen med genindfoldning. Ved genindfoldning finder der sig en transgen organisme sted. Rekombinant DNA-teknologi henviser også til processen med at skabe et gen knock-in. I denne proces skal organismens genom udskæres på specifikke steder under anvendelse af restriktionsenzymer, og derefter finder indsættelse af det målrettede gen sted. Efter indsætning forsegler ligaseenzymet det nye gen til genomet, hvilket skaber en rekombinant organisme.
Rekombinante mikroorganismer anvendes ofte til at fremstille de ønskede produkter, såsom vitaminer, enzymer, hormoner i industriel skala. Endvidere er en almindelig anvendelse af genbank i mus til forskningsformål. De viser, hvordan forskellige gener udtrykker og opfører sig under forskellige miljømæssige og medicinske forhold. Derfor er det vigtigt at bruge genbank i mus til at bestemme de fleste behandlinger ved forskellige sygdomme.
Knockout eller gen knockout er processen med at fjerne et gen helt fra en organisme. Det særlige gen er fuldstændigt deaktiveret under knockout-processen. Forskellige genteknikker er nødvendige for at slå et gen ud. Den resulterende organisme er en transgen organisme med en ændret genetisk sammensætning. Den komplette deaktivering af et bestemt gen finder sted enten ved at introducere en mutation til det bestemte gen eller ved at fjerne det bestemte genfragment ved restriktionsfordøjelse.
Figur 02: Gen Knockout-mus
Først involverede gen-knockout kun en kaldet bakterie Escherichia coli. På nuværende tidspunkt er der imidlertid oprettet mange knockout-mus. Knockout-mus spiller en vigtig rolle i forskningsundersøgelser. De giver konklusioner om, hvordan sletningen af visse gener virker på overlevelsen og eksistensen af organismen. Der er imidlertid mange etiske begrænsninger, der vedrører dette koncept.
Gen-knockout spiller en vigtig rolle i analysen af genetik for forskellige medicinske tilstande og vurdering af effektiviteten af terapier på forskellige gener.
Forskellen mellem knock-in og knockout afhænger af teknikken til fremstilling af en transgen organisme. Indtrækning eller genindfoldning er processen med at indsætte et nyt gen i organismen. I modsætning hertil er gen-knockout processen med fuldstændigt deaktivering eller fjernelse af det ønskede gen. Hver metode resulterer i forskellige resultater afhængigt af ændringen.
Nedenstående infografik giver flere oplysninger om forskellen mellem knock-in og knockout.
Knock in og knockout henviser til to metoder til at skabe transgene organismer ved enten at indsætte eller fuldstændigt deaktivere gener. Disse to metoder er således vigtige i forskning og i forskellige industrielle anvendelser. Rekombinant DNA-teknologi er processen til at skabe disse gen knock-out og gen knockout. Gen knock-out og knockout spiller en fordelagtig rolle; den etiske begrænsning bag skabelsen af gen knock-out og knockout er dog et spørgsmål om debat i det videnskabelige samfund. Så dette opsummerer forskellen mellem knock-in og knock-out.
1.” Gen Knockout vs Knockdown ”, Sino Biologisk, tilgængelig her.
2. "Gen Knock-In." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 23. juli 2019, tilgængelig her.
1. “Knockout Mice5006-300” Af Maggie Bartlett, NHGRI. - (Public Domain) via Commons Wikimedia