Forskellen mellem monolag og suspensionskultur
Share
Nøgleforskel - monolag vs Suspension Culture
Vævskultur er en metode, der bruges til at inducere væksten af celler, der er adskilt fra organismen og dyrkes i forskellige kulturmedier. I vævskultur spiller kulturmedierne en vigtig rolle. Forskellige celler vokser i forskellige kulturmedier afhængigt af cellernes fysiologiske og kemiske træk. Monolagskultur og suspensionskultur er to hovedtyper af kulturer, der anvendes under processen med vævskultur. En monolagskultur er en afhængig af forankring kultur, hvor cellen vokser, mens den er bundet til et underlag, og suspensionskultur er en ankerplads uafhængig kultur, hvor celleaggregater bruges til at etablere cellekulturer i flydende medier. Dette er vigtigste forskel mellem monolagskultur og suspensionskultur.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er monolagskultur
3. Hvad er suspensionskultur
4. Ligheder mellem monolag og suspensionskultur
5. Sammenligning side ved side - Monolag vs suspensionskultur i tabelform
6. Resume
Hvad er monolagskultur?
Monolagskultur defineres som en type kultur, hvor celler dyrkes i et enkelt lag på en kolbe eller petriskål indeholdende kulturmediet. Monolagskultur omtales også som vedhæftende kultur eller forankringsafhængig kultur. Årsagen til at henvise til klæbende eller forankringsafhængig kultur er, at disse celler har brug for et underlag til fastgørelse under deres vækst. De klæbes til cellekulturen, der indeholder underlaget.
De underlag, der anvendes i kulturmediet, skal oplades før brug. Disse ladede substrater fremmer interaktion mellem celle og celle. Elektrisk ionafladning, divalente kationbelægninger og gammastråling er de kilder, der bruges til at oplade disse underlag. Når cellerne er inokuleret i monolagskulturmedium, reguleres væksten under anvendelse af processen kaldet kontaktinhibering. Under kontaktinhibering standses cellevæksten for at stoppe spredning af normale celler, når de dannede et monolag bundet til overfladen.
Figur 01: Vedhæftet kultur
De celler, der er afhængige af andre substrater til fastgørelse, kaldes vedhæftende celler. Disse vedhæftede celler er ofte afledt fra organvæv, såsom nyre osv. Disse celler er ubevægelige og er typisk bundet til bindevævet. Derfor bør alle disse væsentlige vækstfaktorer tilvejebringes, når disse celler dyrkes på kulturmedier. Betydningen af monolagskultur er, at den efterligner de oprindelige naturlige betingelser for, at cellen kan etablere korrekt.
Hvad er suspensionskultur?
En suspensionskultur kunne defineres som en type kultur, hvor multiplikation af lille aggregat af celler eller enkeltceller finder sted suspenderet i et flydende medium, der konstant omrøres. Med andre udtryk er suspensionskultur også kendt som cellekultur af cellesuspensionskultur. Denne kultur hjælper med etablering af enkeltcellekulturer, der kunne anvendes i undersøgelsen af planteceller med hensyn til deres forskellige potentialer og egenskaber. Undersøgelse om dette aspekt kunne bruges til at forstå sammenhængen mellem celler og deres indflydelse, når det kommer til multicellulære organismer.
Under den første planteudvikling dannes en callus, der er en masse udifferentierede celler. Dette vækstniveau forårsager hindringer for identifikation af cellulære begivenheder i plantens vækst- og udviklingsfaser. Suspensionskultur blev indført for at overvinde denne situation, da den tilvejebragte et fremragende kulturmedium til etablering af enkeltcellekulturer fra små celleaggregater opnået fra callus. Dette blev brugt til at undersøge forskellige morfologiske og biokemiske aspekter i de første stadier af en plantes udvikling.
Figur 02: Suspensionskultur
I forbindelse med opnåelse af en ideel cellekultur er den typiske metode at overføre en sprød masse af callus til et omrørt flydende medium, hvor massen brydes og spredes let. Herefter screenes de store calli ud, idet de små celleaggregater og enkelt celler. Derefter overføres disse celler til et andet medium. Aktivt voksende celler opnås efter to til tre uger.
Hvad er ligheden mellem monolag og suspensionskultur?
- Både monolagskulturer og suspensionskulturer er to typer cellekulturer, der anvendes til etablering af celle
- Både monolag og suspensionstyper af kulturer dyrkes på passende kulturmedier.
- Både monolag og suspensionskulturer anvendes ofte i vævskultur.
Hvad er forskellen mellem monolag og suspensionskultur?
Monolayer vs Suspension Culture | |
| En monolagskultur er en forankringsafhængig kultur, hvor cellerne dyrkes, mens de er bundet til et substrat. | Suspensionskultur er en forankringsuafhængig kultur, hvor multiplikation af små aggregater af celler eller enkeltceller finder sted suspenderet i et flydende medium, der er omrørt. |
| Krav | |
| Monolagskultur kræver en vævskulturbehandlet kar med periodisk passering. | Suspensionskultur kunne opnås ved ikke-vævskulturbehandlede kar. |
| Vækstbegrænsninger | |
| Væksten af monolagskultur vil være begrænset af det overfladeareal, der direkte påvirker udbyttet. | Vækstbegrænsning af suspensionskulturen finder sted ved koncentration af celler i mediet. |
| Celle Dissociation | |
| Celle dissociation finder sted mekanisk eller enzymatisk i monolagskultur. | Suspensionskultur kræver ikke hjælp af enzymer og mekaniske midler til celledissociation. |
| Cellevisualisering | |
| Monolagskultur tillader let visualisering af celler. | Det er sværere at se celler i suspensionskulturer. |
| Fungere | |
| Monolagskultur anvendes inden for cytologi, forskning og kontinuerlig høst af produkter. | Suspensionskultur bruges til bulkproduktion af proteiner, forskningsundersøgelser og batch høstning. |
Resume - Monolayer vs Suspension Culture
Monolagskultur og suspensionskultur er to hovedkulturer anvendt i vævskultur. Monolagskulturen er en forankringsafhængig kultur. Cellerne dyrkes i denne kultur, hvor de er bundet til et substrat, der er til stede i kulturen. Underlagene oplades før brug med involvering af forskellige kilder, såsom divalente belægninger og ionudladning. Suspensionskulturer er forankringsuafhængige kulturer, hvor cellerne vokser uden hjælp af et underlag til fastgørelse. Denne kultur hjælper med etablering af enkeltcellekulturer, der kunne anvendes i undersøgelsen af planteceller med hensyn til deres forskellige potentialer og egenskaber. Dette er forskellen mellem monolagskultur og suspensionskultur.
Reference:
1. “Cell Suspension Culture: Definition, Princip, Protocol and Importance | Plantevæv. ” Biologisk diskussion, 26. oktober 2015. Tilgængelig her
2. "Vedhæftede & suspenderende cellekulturer." Study.com, Study.com. Tilgængelig her
Billede høflighed:
1.'Cellkultur på PNIPAM'By Guillaume Paumier (bruger: guillom) - Eget arbejde, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.'Sphagnum palustre i Bioreactor'By ReskiLab, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
