Forskningsområdet har taget en stor vending med introduktionen af cellekultur og brugen af cellelinjer til forskning. Forskellige tests udføres på kunstigt fremstillede celler og cellelinjer for at vurdere cellens opførsel. Mest human-baseret forskning kræver celledyrkning og cellelinjer for at validere resultaterne, især når forskningsundersøgelserne er baseret på farmakologi og lægemiddelopdagelse. Primær cellekultur er en kultur fremstillet ved direkte isolering af celler ved hjælp af mekaniske eller enzymatiske metoder. En cellelinie fremstilles ved kontinuerlig at passere en primær cellekultur for at opnå en cellelinje, der har erhvervet homologe tegn. Det vigtigste forskel mellem den primære cellekultur og cellelinjen er antallet af passeringstider, som hver af dem besidder. Den primære cellekultur isoleres direkte, medens en cellelinie fremstilles ved at passere en primær cellekultur flere gange.
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er en primær cellekultur
3. Hvad er en cellelinje
4. Ligheder mellem primær cellekultur og cellelinje
5. Sammenligning side ved side - Primær cellekultur vs cellelinie i tabelform
6. Resume
Primær cellekultur er et cellekulturpræparat ved at isolere celler direkte fra kilden via mekaniske eller enzymatiske metoder. Cellerne isoleres ved trypsiniseringsmetoder eller ikke - trypsiniseringsmetoder. De primære cellekulturer dyrkes i passende vækstmedier, der indeholder vækstfaktorer, hormoner, lipider og andre udefinerede komponenter. Visse medier skal ledsages af serum. Medierne sikrer, at betingelserne for vækst optimeres, og at cellerne overlever under optimale betingelser. Celler kan isoleres fra forskellige vævskilder, såsom levervæv, endotel og neuralt væv hos mennesker eller højere dyr via trypsinisering.
Når man isolerer celler fra planter og mikroorganismer, anvendes specielle ekstraktionsprocedurer, der anvender både mekaniske og kemiske metoder. Disse isolerede celler kan immobiliseres på en fast bærer eller kan passeres i flere generationer for at blive udviklet til en cellelinie.
Primære cellekulturer er hovedsageligt af to typer; Klæbende cellekulturer og suspensioncellekulturer. Klæbende primære cellekulturer er forankringsafhængige, og de kræver solid støtte til væksten. De vedhæftede primære cellekulturer stammer hovedsageligt fra væv eller organer. De suspenderede primære cellekulturer er forankringsuafhængige og vokser i flydende medier. Suspensionskulturerne skal omrøres kontinuerligt i vækstfasen. De primære suspensionscellekulturer kan direkte stammer fra blod.
Primære cellekulturer har en relativt mindre levetid, men informationen stammer fra primære cellekulturer under in vitro betingelser giver det grundlæggende fundament for mange studier. De er nyttige til at undersøge celleegenskaber, både morfologisk og kemisk opførsel.
Cellelinier er vidt brugt i forskning, og på nuværende tidspunkt er cellelinjer såsom kræftcellelinjer, levercellelinjer og nyrecellelinier kommercielt tilgængelige til forskningsformål. Cellelinierne fremstilles ved kontinuerlig passage af primær cellekultur. Passaging henviser til subkulturprocessen, hvor cellekulturerne udvikles til en cellelinie. Disse cellelinjer er kulturer i en to - dimensionel eller tredimensionel matrix og opretholdes som cellelinjer.
Cellelinjer klassificeres som endelige og kontinuerlige cellelinjer. Endelige cellelinjer underkastes et bestemt antal passager (20 - 30 passager). Efter afslutning af det krævede antal passager indtaster cellelinjen et senescensstadium. Disse celler er lette at håndtere, da deres vækst er bestemt. Det kontinuerlige cellelinjer kaldes også udødeliggjorte cellelinjer. Disse cellelinjer har ikke et bestemt antal passager. De vokser på ubestemt tid og er således i stand til at erhverve mutationer. Derfor kan kontinuerlige cellelinier let muteres, og de ændrer sig således i deres morfologiske og genetiske egenskaber, i modsætning til i endelige cellelinjer.
Figur 01: Cellelinje
Cellelinjer bruges, da det er mere praktisk end at bruge en primær cellekultur, da det kan bruges igen og igen i en bestemt periode. Men det er mere udsat for mutationer og forurening, efterhånden som deres spredning øges.
Primær cellekultur vs cellelinje | |
En primær cellekultur er en kultur fremstillet ved direkte isolering af celler ved hjælp af mekaniske eller enzymatiske metoder. | En cellelinie fremstilles ved kontinuerlig at passere en primær cellekultur for at opnå en cellelinje, der har erhvervet homologe tegn. |
Antal passager | |
Primære cellekulturer passeres ikke, celler opretholdes under kulturbetingelser. | Celler overføres definitivt eller på ubestemt tid ved fremstilling af cellelinjer. |
typer | |
Adhærent primær cellekultur og Suspension primær cellekultur er to typer af primære cellekulturer. | Endelig cellelinje og kontinuerlig cellelinje er to typer cellelinjer. |
levetid | |
Primære cellekulturer har en kort levetid. | Cellelinjer har en længere levetid. |
Primære cellekulturer og cellelinjer er vidt brugt i forskning til at studere adfærdsmønstre for forskellige celler under forskellige betingelser og under forskellige farmakologiske aspekter. Primære cellekulturer isoleres direkte fra kildeorganet eller vævet og dyrkes på et kulturmedium. Betingelserne er optimeret til vækst af de specifikke celler. I modsætning hertil fremstilles cellelinjer ved at passere de primære cellekulturer til et begrænset eller uendeligt antal gange. Cellelinjer er kommercielt tilgængelige og er populære blandt forskere på grund af brugervenligheden.
1.Lonza, Primære celler vs. cellelinjer. Tilgængelig her
1. 'Menneskelig cellelinjekoloni klones in vitro ved hjælp af kloningsringe' Af Paphrag (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia