Forskellen mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA
Share
Det vigtigste forskel mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA er det konkurrencedygtig ELISA bruger et inhiberingsantigen, medens ikke-konkurrencedygtigt ELISA ikke bruger et inhiberingsantigen til assayet.
Enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) er et immunologisk assay, der detekterer forskellige mål, såsom antistoffer, antigener, proteiner og glycoproteiner. Det er en hurtig og enkel metode at udføre. Derfor bruges det oftere til forsknings- og diagnostiske formål. ELISA involverer brugen af enzymer og den specifikke binding af antistof og antigen. Baseret på hvordan reaktionerne forekommer, er der fire typer ELISA: direkte ELISA, indirekte ELISA, sandwich ELISA og inhiberende ELISA. Direkte, indirekte og sandwich-ELISA er typer af ikke-konkurrencedygtig ELISA, mens inhibering ELISA er en type komplet ELISA. Hovedmålet med denne artikel er at diskutere forskellen mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er konkurrencedygtig ELISA
3. Hvad er ikke-konkurrencedygtig ELISA
4. Ligheder mellem konkurrerende og ikke-konkurrencedygtig ELISA
5. Sammenligning side ved side - Konkurrencedygtig vs ikke-konkurrencedygtig ELISA i tabelform
6. Resume
Hvad er konkurrencedygtig ELISA?
Konkurrencedygtig ELISA måler antigenkoncentrationen i en prøve gennem påvisning af signalinterferens. Her anvender assayet et inhibitorantigen. Derfor er det en type inhibering ELISA. Under denne procedure konkurrerer antigenerne, der er til stede i prøven, med det valgte referenceantigen om binding til en specifik mængde mærket antistof. Desuden starter denne procedure med inkuberingen af prøven med den overskydende mængde mærket antistof. Referenceantigenet skal også forhåndsovertrækkes på en plade med flere brønde. Derefter sættes prøveblandingen til analysepladen, der indeholder referenceantigenet. Frie antistoffer vil binde til referenceantigenet afhængigt af mængden af antigen i prøven. Hvis der findes mere prøveantigen, vil der derfor blive detekteret mindre referenceantigen. Således skaber det et svagere signal.
Figur 01: ELISA
I modsætning hertil, når prøven indeholder mindre mængde antigen, vil mere og mere referenceantigen optage antistofferne og give et stærkt signal. Da konkurrencedygtig ELISA giver et stærkere signal, når prøven indeholder en lav mængde antigener, er konkurrerende ELISA et meget følsomt assay, selv for prøver med et lille antal antigener.
I nogle konkurrerende ELISA-sæt anvendes et mærket antigen i stedet for et mærket antistof. Her vil det mærkede antigen og prøveantigenet konkurrere om binding til det primære antistof. På lignende måde, når mængden af antigen i prøven er lav, vil mængden af mærket antigen, der binder til antistoffer, være højere og skabe et stærkere signal.
Hvad er ikke-konkurrencedygtig ELISA?
Blandt de fire typer ELISA er tre typer ikke-konkurrencedygtige ELISA. De er direkte ELISA, indirekte ELISA og sandwich ELISA. Alle tre formater fungerer under ELISAs fælles princip med små forskelle i deres metoder.
Direkte ELISA bruger et enzymmærket primært antistof. Derfor kræver det ikke et sekundært antistof. Derfor er direkte ELISA hurtigere end andre typer ELISA. Det primære antistof binder direkte til det immobiliserede målantigen, der er til stede i pladen. Derfor vil enzym-substratreaktionen finde sted, hvilket frembringer et synligt signal.
Figur 02: Sandwich ELISA
I modsætning til direkte ELISA bruger indirekte ELISA et umærket primært antistof og et enzym mærket sekundært antistof. Når det primære antistof binder til det immobiliserede antigen, binder det sekundære antistof til det primære antistof. Enzymet i det sekundære antistof reagerer med antigenet og frembringer et synligt signal. Sandwich ELISA er forskellig fra både direkte og indirekte ELISA. Her er antistoffet immobiliseret til væggen på analysepladen.
Hvad er ligheden mellem konkurrerende og ikke-konkurrencedygtig ELISA?
- Konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA er to typer immunosorbent-analyseteknikker.
- Det er meget fleksible og følsomme teknikker.
- Endvidere er både konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA enzymbundne immunoassays.
- Begge metoder genererer også et signal på grund af en enzym-substrat-reaktion.
Hvad er forskellen mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA?
Konkurrencedygtig ELISA er en type ELISA, der er afhængig af færdiggørelsen mellem analytantigen og mærket antigen for en begrænset mængde specifikt antistof. På den anden side findes der ikke en sådan konkurrence mellem antigen af interesse og referenceantigen i ikke-konkurrencedygtig ELISA. Dette er således den vigtigste forskel mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA. Tilsvarende er konkurrencedygtig ELISA en inhiberende ELISA, mens ikke-konkurrencedygtig ELISA ikke er en inhiberende ELISA. Så dette er også en forskel mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA.
Desuden er konkurrencedygtig ELISA mere egnet til at måle en lav mængde antigen af interesse. Det er en følsom metode. På den anden side afhænger ikke-konkurrencedygtig ELISA ikke af antallet af antigener, der er til stede i en prøve. Derfor er dette også en forskel mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA.
Nedenfor infographic forklarer forskellen mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA sammenligneligt.
Sammendrag - Konkurrencedygtig vs ikke-konkurrencepræget ELISA
Konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA er de to hovedtyper af ELISA eller enzymbundet immunosorbentassay. Ved at opsummere forskellen mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA, afhænger den konkurrencedygtige ELISA på konkurrencen mellem antigen af interesse og referenceantigen mod den begrænsede mængde antistoffer. Derfor er konkurrencedygtig ELISA også benævnt som inhiberende ELISA. På den anden side er ikke-konkurrencedygtig ELISA ikke afhængig af konkurrencen mellem målantigener og referenceantigener. Det bruger et overskud af mærket specifikt antistof mod analytten af interesse. Dette er således den vigtigste forskel mellem konkurrencedygtig og ikke-konkurrencedygtig ELISA. Direkte ELISA, indirekte ELISA og sandwich ELISA er de tre hovedtyper af ikke-konkurrencedygtig ELISA.
Reference:
1. Bio-Rad. “Typer af ELISA | Bio-Rad.” Bio, tilgængelig her.
2. “Fire typer ELISA.” Cusabio Life Science - Din partner til biologisk videnskab, tilgængelig her.
Billede høflighed:
“Elisa tipus” af Carolfv333 - Eget arbejde (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
“Sandwich Immunoassay, ELISA” Af NickCT - Eget arbejde (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
