Forskellen mellem HPLC og LCMS

Nøgleforskel - HPLC vs LCMS
 

Lad os først se på betydningen af ​​HPLC og LCMS, før vi analyserer forskellen mellem HPLC og LCMS. Kromatografi er en separeringsteknik i kemisk analyse, hvor prøvebestanddele adskilles under passage gennem et kromatografisk medium. Det involverer også interaktion med prøven, den stationære fase og den mobile fase. HPLC står for Højtydende flydende kromatografi, og den bruges som en flydende kromatografimetode i analytisk kemi. Kombinationen af Flydende kromatografi og massespektroskopi (LCMS) er udviklet til kvantitativ analyse af udvalgte biomolekyler, og det er den en meget følsom, nøjagtig og specifik assayprocedure sammenlignet med HPLC. Dette er nøgleforskel mellem HPLC og LCMC. Denne artikel introducerer dig til HPLC og LCMC, der beskæftiger sig med kemisk analyse og diskuterer forskellene mellem HPLC og LCMS.

Hvad er HPLC?

Højtydende væskekromatografi (HPLC) er en populær adskillelsesteknik i analytisk kemi. Det er hovedsageligt bruges til at adskille komponenterne, til at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding. Tidligere blev denne metode kendt som højtryksvæskekromatografi fordi det var afhængigt af pumper for at strømme et flydende opløsningsmiddel, der omfattede prøveblandingen, gennem en søjle pakket med et fast adsorbentmateriale. Hver bestanddel i prøveblandingen interagerer forskelligt med det faste adsorberende materiale, hvilket resulterer i forskellige strømningshastigheder for forskellige bestanddele. Dette kan føre til adskillelse af bestanddelene, når de strømmer ud af HPLC-søjlen.

HPLC er blevet brugt til forskellige applikationer såsom analyse af vitamin D-niveauer i blod, ulovlig stofbrug af atleter ved at detektere medikamentrester i deres urin, sortering af bestanddelene i en kompleks biologisk prøve til forskningsformål og analyse og fremstilling af lægemidler.

Hvad er LCMS?

Væskekromatografi-massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske adskillelsesevner for væskekromatografi med masseanalyseværdierne for massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separationsteknik, og massespektrometri bruges til at analysere masse-til-ladning-forholdet mellem ladede partikler. Den fysiske adskillelse opnås normalt ved HPLC og alternativt LCMS også kendt som HPLC-MS. LCMS er en dominerende analytisk teknik der har en meget høj nøjagtighed, følsomhed og specificitet sammenlignet med HPLC. Det er således nyttigt i mange anvendelser, såsom forskningsformål, lægemiddelanalyse, fødevareanalyse osv. LCMS er hovedsageligt bruges til at adskille, til at detektere, identificere og kvantificere biokemiske egenskaber af en bestemt prøve i nærvær af komplekse kemiske blandinger.

Hvad er forskellen mellem HPLC og LCMC?

Forkortelse og definition af HPLC og LCMC

HPLC: HPLC står for High-Performance Liquid Chromatography. Det er en adskillelsesteknik, der hovedsageligt bruges til at adskille komponenterne, til at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding.

LCMS: LCMS står forFlydende kromatografi og massespektrometri. Det er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske adskillelsesegenskaber ved væskekromatografi med masseanalyseværdierne i massespektrometri (MS).

Kendetegn ved HPLC og LCMC

Klassifikation

HPLC: Dette er kun en flydende kromatografimetode.

LCMS: Dette er en kombination af Liquid Chromatography-metoden og Mass Spectrometry-metoden.

Effektivitet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og langsommere.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og hurtigere.

Følsomhed

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere følsom.

Specificitet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre specifik.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere specifik.

Nøjagtighed

HPLC: HPLC giver mindre nøjagtige resultater end LCMS til bestemmelse af nogle kemikalier.

LCMS: LCMS giver mere nøjagtige resultater end HPLC til bestemmelse af nogle kemikalier.

Komponent

HPLC: HPLC kan betragtes som en komponent i LCMS.

LCMS: LCMS kan ikke betragtes som en komponent i HPLC.

Ionkilde

HPLC: Ionkilde findes ikke i HPLC-instrument.

LCMS: Ionkilde findes i LCMS-instrument.

Applikationer

HPLC: Ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved anvendelse af HPLC.

LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. I modsætning til HPLC kan LCMS bruges til at undersøge ufuldstændigt opløste blandinger.

Operation

HPLC: Diagrammet over et HPLC-instrument er vist i figur 1, og det inkluderer normalt en autosampler, pumper og en detektor. Prøveudtageren introducerer prøveblandingen i den mobile fase (trykblanding af opløsningsmidler, såsom vand, acetonitril og / eller methanol), der overfører den til søjlen. Pumpene leverer den ønskede strømning og sammensætning af den mobile fase gennem søjlen. Søjlen fyldes med adsorbenten, som er en kornet, fast partikel, såsom silica eller polymerer. Detektoren frembringer et signal, der står i forhold til mængden af ​​prøvebestanddelens tilstedeværelse i søjlen, hvilket tillader derfor kvantificerbar analyse af de valgte prøvebestanddele. HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse leveres af en digital mikroprocessor og brugersoftware.

Figur 1: Diagram over HPLC-instrument

LCMS: Diagrammet over LCMS-instrument er angivet i figur 2. Prøveekstrakten indsættes i søjlen bestående af HPLC. Denne søjle beholder prøvemetabolitter baseret på fysiske karakterer, og forskellige metabolitter flyder til massespektrometeret ved forskellige tidsintervaller. Massespektroskopi anvendes til vurdering af masser af partikler, til bestemmelse af et molekyls elementære arrangement og til at klarlægge molekylstrukturer. Prøven bør imidlertid ioniseres for at generere ladede molekyler for at bestemme deres masse-til-ladning-forhold. I stedet for HPLC-instrumenter består LCMS derfor yderligere tre moduler, såsom jernkilde, en masseanalysator og en detektor. En ionskilde kan omdanne gasfaseprøve til ioner og en masseanalysator, der grupperer ionerne efter deres masser ved hjælp af elektromagnetiske felter. Endelig kvantificerer en detektor værdierne og leverer data for hver ion til stede i prøven. LCMS-teknikken kan bruges til både kvalitative og kvantitative applikationer.

  Figur 2: Diagram over LCMS instrument

Som konklusion er HPLC en flydende kromatografimetode, hvorimod LCMS er en kombination af væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikker har forskellige egenskaber, men de kan bruges til at identificere og kvantificere fødevaresammensætninger, farmaceutiske stoffer og andre bioaktive molekyler.

Referencer Arpino, P. (1992). Kombineret væskekromatografimassespektrometri. Del III. Anvendelser af termospray. Massespektrometri anmeldelser, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. og Spoendlin, C. (2004). Praktiske aspekter ved hurtig reverseret fase højtydende væskekromatografi ved anvendelse af 3μm partikelpakede søjler og monolitiske søjler i farmaceutisk udvikling og produktion, der arbejder under den nuværende gode fremstillingspraksis. Tidsskrift for kromatografi, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. og Kerns, E. H. (1999). LC / MS-applikationer i lægemiddeludvikling. Massespektrometri anmeldelser, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Kobling af matrixassisteret laser desorption / ionisering til væskeseparationer. Massespektrometri anmeldelser 16 (5): 283. Billedlighed: “Hplc” af den originale uploader var Kjaergaard på en.wikipedia - Overført fra en.wikipedia. (Public Domain) via Commons